文档介绍：山东大学
博士学位论文
汉坦病毒结构蛋白基因的克隆、序列分析和表达研究
姓名:陶泽新
申请学位级别:博士
专业:流行病与卫生统计学
指导教师:王志玉
20070406
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始论文作者签名:豳洼纽论文作者签名:啕堡堑导师签名:日期:垫翌:兰:兰原创性声明关于学位论文使用授权的声明本人郑重声明:所呈交的学位论文,是本人在导师的指导下,独立进行研究所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外,本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的科研成果。对本文的研究作出重要贡献的个人和集体,均已在文中以明确方式标明。本声明的法律责任由本人承担。C苈畚脑诮饷芎笥ψ袷卮斯娑本人同意学校保留或向国家有关部门或机构送交论文的印刷件和电子版,允许论文被查阅和借阅;本人授权山东大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或其他复制手段保山东大学博士学位论文存论文和汇编本学位论文。
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汉坦病毒结构蛋白基因的克隆、序列分析和表达研究专业:流行病与卫生统计学中文摘要博士生:陶泽新导师:王志玉教授汉坦病毒琀属于布尼亚病毒科汉坦病毒属。在临床上引起肾综合征出血热和汉坦病毒肺综合征,:禾共《竟灿多种基因型和血清型,但中国目前为止仅发现汉滩型,、汉城型,和普马拉型,,均为的病原体。临床上以发热、出血和肾损害为主要特征,它包括朝鲜出血热、流行性出血热和流行性肾病,每年在欧洲和亚洲有近万病例发生。较早的报道可追溯到苏联在和年,日本军队年在满洲里,瑞典在年的暴发流行。自从年李镐汪等从疫区的黑线姬鼠肺组织中分离到汉坦病毒株以来,各国学者相继分离到不同型别的汉坦病毒。引起的汉坦病毒包括汀型、多不拉伐一贝尔格莱德型,和型,分别引起重度、中度和轻度的临床症状。年首先在美国的四角地区暴发,临床上早期出现发热、寒战等前驱症状,然后是突发性的呼吸困难,严重者导致死亡,病死率高,震惊了美国的公共卫生官员和病毒学家。研究表明该病毒病原为型汉坦病毒,由鹿鼠携带,随后又从不同地区的∪颂迥诜掷氲絅、等不同型别汉坦病毒。在我国尚未有±谋ǖ馈各种鼠类是汉坦病毒重要的宿主和传染源,他们各自携带不同的型别汉坦病在南斯拉夫及邻近地区,携带的欧洲棕背鼠存在于西北欧地区,而由褐家鼠携带的在世界范围内广泛存在。毒。携带的黑线姬鼠主要在东亚和东欧,携带的黄颈喉姬鼠出现山东大学博士学位论文,
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汉坦病毒引起的在我国发病率高,是重点防治的传染病之一。中国病人总数占世界发病人数的%以上,每年新发病例数万。而山东省是的高发省份,年发病人数在我国常年位于前唬昵霸蛭H国第一位。山东省己发病例数占全国总病例数的。可见山东省防治的工作具有极为重要的现实意义。山东引起的汉坦病毒以臀V鳎原学的研究进展,包括病毒分离、病毒基因及蛋白质的结构与功能的研究、分子流行病学、新型疫苗、新型诊断试剂的研究与开发等,其中对汉坦病毒的基因进行分析和分子流行病学研究又是最根本和最基础的研究。而山东省分离全片段测序的病毒株太少,对它们的分子生物学性质尚缺乏深入研究。汉坦病毒颗粒为圆形或卵圆形,外层是包膜,表面有突起,由和糖蛋白珿组成。包膜内为病毒核酸、核衣壳蛋白琋和酆厦缸槌傻暮艘驴牵《咎逯泻艘驴堑鞍壮煞趾芨摺2毒基因组为单股负链沙、中⒍三个节段组成,分别编码依赖腞多聚酶,和包膜糖蛋白和核衣壳蛋白。、包膜糖蛋白对病毒的致病性起重要作用,包含了病毒的中和抗原位点、受体结合位点、融合肽和血凝位点。沃蠫谋嗦胨承蛭瓽瓽瓹片段首先编码产生一个奶堑鞍浊疤珿缓笤诜氲耐北幌赴诘男藕烹拿盖懈畛蒅礁龅白,组成异二聚体表达在内膜系统,部分转运至细胞膜表面,切割位点为一段绝对保守的陌被嵝蛄小脖泶锸嵌咴诎谟行ёT撕托惺构能的基础。、富含半胱氨酸残基,维持了异源二聚体在内膜系统管腔内高度有序的空问结构。、蛋白共有个涣腔坏悖诙厶宓鞍的正确折叠中起一定作用。、,但至今尚未能确定蛋白的说恼嬲钩桑蛭狧腉鞍嗽诎谌菀妆坏鞍酌附到猓庖渤晌O赴刑堑鞍妆泶锼降偷脑蛑弧病毒的糖蛋白在高尔基体膜表面累积成熟后,包裹由鞍缀突蜃镽形成的核衣壳,在高尔基体膜上出芽,通过内膜系统的转运释放到胞外。位虻的核衣壳蛋白在感染的细胞中高度表达,形成大颗粒状或丝状的包涵体,有《敬嬖冢腔旌弦咔6訦恼锒虾头乐喂楦岬兹【鲇诙云洳变异速度是三个节段中最快的,是决定毒力的主要因素。山东大学博士学位论文
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在包裹病毒基因组⒆樽安《究帕V衅鹬匾W饔谩:艘驴堑鞍椎陌被嵝列较为保守,其免疫原性很强。其说陌被嶂饕J乔姿缘模哂懈叨鹊抗原保守性,几乎所有的人类血清抗体都能识别此区;中间部分主要是亲水性区域,在不同的中变异较大,。核蛋白刺激机体产生的抗体效价比、糖蛋白高。病人血清中抗