文档介绍：堡塞验和病毒学杂志年月第卷第期。....
. 技术方法.
筛选一蛋白适配子的一种简便的
方法
詹少兵,张晓光,李红霞,曾毅
【摘要】目的快速筛选一抗原适配子,并验证其特异性与亲和力。方法利用聚碳
酯材料板包被抗原,在板中运用技术进行适配子筛选。对多条适配子序列进
行了一级结构及二级结构软件分析。酶联免疫法对筛选到的适配子进行亲和力及特异性验
证。结果确定用聚碳酯材料可以包被抗原,法检测抗原包被浓度与吸光度值正相
关;电泳显示适配子得到富集筛选;测序后软件分析表明多条适配子有共有序列,空间结构多样;用
法,结合辣根过氧化物酶标记链霉亲和素与生物素标记的适配子,对适配子与
的亲和力进行验证,表明筛选到的适配子与抗原有特异性的高亲和力结合。结论建立了
一种简便的筛选一抗原适配子的方法,筛选到特异性的高亲和力适配子。
【主题词】;配体系统进化技术;适配子
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指数富集的配体系统进化技术是近不足。还可以应用于临床治疗等。与抗体相比,适
些年来发展起来的筛选方法,可从单链核酸库配子有明显的优势:适配子与靶分子的结合能力强、
中筛选与靶分子特异结合的核酸分子一适配子特异性更强、筛选周期短、可体外化学合成、比抗体
。适配子具有能够特异性与靶物质牢固的分子小、可反复使用、长期保存和室温运输,稳定,
结合的特性,使其可以在很大程度上替代抗体的作并且易于标记修饰等。
用,而且在许多抗体还无法应用的领域也能发挥作目前技术在生物医学方面已经得到广
用。其可以作为诊断试剂,单独或与抗体组合应用泛的应用。有文献报道筛选到艾滋病毒相关
于多种诊断模式,以弥补抗体在诊断领域中应用的抗原的适配子,并且应用到实际的检测及治疗过程
中。对适配子的筛选也有报道,但具
:./...... 体应用仍有差距。本研究采用一种简易的筛选
作者单位: 北京,中国疾病预防控制中心病毒病预防控方法,
制所肿瘤室,传染病预防控制国家重点实验室
异结合的适配子,并进行了鉴定验证。
通信作者:曾毅,:...;电话:
.
史堡塞验塑痘毒学杂年月第卷第期,。.。
性的结合,可以用于后续的实验研究。板的结合。并进一步将适配子的筛选与次一
轮的反应结合到了一起,简化了操作步骤。
对适配子与的结合进行免疫酶方法验证,
并且在板上进行的亲和力分析表明,这种简
便方法,已经筛选到了抗原的特异适配子。对
本实验筛选到多条适配子,进行了序列分析。其中
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筛选轮次有两条适配子序列完全一致。条适配子中,共有
序列明显;对二级结构进行分析发现,多条适配子高
图适配子酶联免疫反应亲和力检测
. 级结构中的锤头结构含及序列。
在筛选到抗原特异的适配子的基础上,将
来与免疫方法结合,在保证特异性的同时,利
讨论
用反应的扩增提高灵敏度,并有希望用