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小麦Rubisco抗体的制备和旗叶中Rubisco含量的ELISA测定.pdf

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文档介绍

文档介绍:万方数据
万方数据
7(T)2小麦⑷缗綼石螸..锫号,室内AmershBiosciencs(Sweden)HRPlinolB4I002SDS2DMSO)12盆钵种植。大白兔购自中国科技大学西区动物房。兔抗体购自华美公司。Rubisco(2001)G25SephacrylSDSPAGENDPAGE定钗婪嫉龋。使其相互融合达到油包水状态。采用多点皮内注射免疫健康的大白兔,笤俜直鸾辛酱渭忧棵庖佐剂为弗氏不完全佐剂周后,于耳垂静脉处采血,舛ㄆ湫Ъ鄞笥)10011L100L2性对照,免疫的兔抗血清依倍稀释分别加入包被的反应孔中,二抗为冲标记的羊抗兔抗体:H2s04()oDl4(negatiVe)>21.—电泳,用半干转移法将蛋白转移Rubisco1hLISARubiscoRubisco陌幻副臧蹇祝豢刮猂抗体:刮P舵け昙堑难蚩雇每固,显色底物为觳锄绘制标准曲线。,含タ扇苄訮Ⅵ,,rminl.。僖由标准曲线计算Rubisco用便携式红外线气体分析仪⒐(1)Wem呈阳性反应廾庖呓徊娣从Γ得鱎抗RubiscoRubiscoRubisco(2)Rubisco抗体对抗原浓度最为敏感。据此,在nIlLRubisco横坐标,以所得仞鲋滴W葑昊嬷芌浓度oDy=03289x+Rubisco实验材料购12Rubisco了改进。即将小麦鲜叶匀浆后通过%~%饱和.~梯度洗进RubiscoRubisco14cRubiscoRubisco(1mnL)(超声功率/总时间:000间接检测抗体效价Rubisco(005碳酸盐1000)55PBsTween20(O05)波长为墓馕铡卵/效价。bIotRubisco检测时将某跆嵋汉痛縍经至硝酸纤维素膜上,ネ阎谭娣獗(11000)A4Tris-HCl(01molL)160L幌愣顾mmolL))8L%,荧光显现后,将膜的正面朝x16E17Rubisco500新鲜叶片,。lbiscoEuSA光合速率测定)采用硫酸铵分段盐析ァ,蜒危占鞍追迳螪畇印Sephacryl以进一步纯l的大亚基,另一条为的小亚基。检测的结果表明,固褰鲈赗条带处Rubiscoǘ鹊腅测定1001000nmLoD的标准曲线8飨∈投鹊腞与对应的农业生物技术学报年F)Sephacryl疞Oo5—s20s80w80hh18F
小麦Rubisco抗体的制备和旗叶中Rubisco含量的ELISA测定
作者: 李卫芳, 王秀海, 贺文娟, LI Wei-fang, WANG Xiu-hai, HE Wen-juan
作者单位: 中国科学技术大学生命科学学院,合肥,230026
刊名: 农业生物技术学报
英文刊名: JOURNAL OF AGRICULTURAL BIOTECHNOLOGY
年,卷(期): 2006,14(3)
被引用次数: 2次

参考文献(6条)
Biotechnology of Plant 1998
R J;i M E Rubisco:structure,regulatory interactions,and possibilities for a
be