文档介绍：现代分离技术实验安排一、实验说明 1、本课程实验为一次性综合大实验,采取分班进行,每班实验必须在连续两天内完成,各组的实验安排均为周六和周日的上午 8点到晚上的 8点。每次实验 1个班,每个实验由两个人共同完成,即两人一组,每组一套实验仪器和一张实验台。每班的班长负责实验室的卫生和安全。 2、课程考核方法采用实验考察形式进行,每人只安排一次实验机会,过期不补,希望各位同学能够按时参加。若有冲突,学生之间可相互对调。 3、进入实验室后,各组同学首先按照仪器清单检查仪器的数量和完好情况。若有仪器短缺或破损等问题,请在上课后 20 分钟内与实验室工作人员及时联系, 并要求实验人员进行补充或更换。 4、实验结束后,各组同学应对照仪器清单检查,分别洗净后交实验人员验收。如有损坏或缺少,应按规定缴纳赔偿金。因此,希望同学们爱惜仪器,认真操作。实验期间, 应注意保持实验室台面、地面和水槽的卫生, 尤其是自己的工作区域。同时应注意实验室的财产安全和自身安全,不可在实验室喧哗吵闹。二、实验内容题目:金银花中绿原酸的提取与分离学习内容: 固体中有效成分的提取(索氏法)技术; 减压浓缩(旋转蒸发)技术; 硅胶吸附柱层析; 硅胶吸附 TLC 技术; 薄层色谱对产品纯度检测金银花为忍冬科忍冬属植物忍冬及同属多种植物的干燥花蕾,它是一种“药食同源”的绿色植物,是临床常用的中药之一。具有清热解毒、凉风散热、抗病毒、保肝利胆的功能,主治痈肿疗疮、喉痹、丹毒、热血毒痢、风热感冒、瘟病发热、急性支气管炎、肺炎、腮腺炎、胆道感染、关节炎等,能改善放、化疗所致的白细胞降低,有“中药中的青霉素”的美誉。另外,金银花还被广泛地应用于保健品、化妆品、卷烟、食品等行业。近代研究一般认为金银花的主要生物活性有效成分为绿原酸类化合物,并且常以绿原酸含量的高低来评价金银花质量的优劣。绿原酸结构式 HOHO O O 2' 3'4' 5'6'8' 9' OH HOOHOH O 12 3 4 56 7' 1'三、实验方案四、方法 1、 TLC 板的制备与活化在干净的研钵内加入约 6g硅胶 GF254 ,在轻轻研磨的同时缓慢加入 15ml % 羧甲基纤维素钠水溶液。继续研磨约 10min ,当体系粘稠度适宜时,即可进行铺板。用药匙将适量糊状物均匀摊在干净干燥的载玻片上,然后用手拿住薄板的一金银花粉末 75 %乙醇,索氏提取回流 4h 残渣滤液(粗提液) 减压浓缩, 60℃干燥粗提物(浸膏) 1:1 硅胶拌样提取物拌样硅胶柱乙酸乙酯:甲酸:水( 不同比例洗脱) 含绿原酸的洗脱液浓缩至干绿原酸粗品绿原酸硅胶柱氯仿-甲醇梯度洗脱端在台面上轻轻振动,直至薄层均匀为止。将铺好的薄板平放在水平的台面上, 凉干。将凉干后的薄板放入预先恒温到 105 ~110 ℃的烘箱中活化 30min 。 2 、提取( 索氏法) 将金银花制成粗粉,称取约 100g,用75% 乙醇采用索氏提取器回流处理 4h,其提取液减压浓缩、 60℃干燥得浸膏。 3 、分离( 1 )粗分离取一定量浸膏,按 1∶1加入 200-300 目硅胶拌样,晾干。用乙酸乙酯湿法装柱(柱型? ×53cm ,硅胶 200-300 目),干法上样,柱体依次用乙酸乙酯、乙酸乙酯-甲酸-水( 20∶ 1∶ )、乙酸乙酯-甲酸-水( 10∶ 1∶