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实验四细菌的分离、接种和培养-2013.doc

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实验四细菌的分离、接种和培养-2013.doc

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实验四细菌的分离、接种和培养-2013.doc

文档介绍

文档介绍:实验四:细菌的分离、接种和培养
一、实验目的:
熟悉从环境(土壤、水体、活性污泥等)中分离培养细菌的方法,掌握以下几种细菌纯培养过程中所涉及的各种技能:
倒平板;
细菌纯种分离:稀释平板分离法和平板划线法;
接种技术:斜面接种技实验四:细菌的分离、接种和培养
一、实验目的:
熟悉从环境(土壤、水体、活性污泥等)中分离培养细菌的方法,掌握以下几种细菌纯培养过程中所涉及的各种技能:
倒平板;
细菌纯种分离:稀释平板分离法和平板划线法;
接种技术:斜面接种技术、稀释平板涂布法等;
无菌操作技术。
并了解不同的微生物在固体培养基中的生长特征。
二、实验原理
在土壤、水、空气或人及动、植物体中,不同种类的微生物绝大多数都是混杂生活在一起,当我们希望获得某一种微生物时,就必须从混杂的微生物类群中分离它,以得到只含有这一种微生物的纯培养,这种获得纯培养的方法称为微生物的分离与纯化。
为了获得某种微生物的纯培养。一般是根据该微生物对营养、酸碱度、氧等条件要求不同,而供给它适宜的培养条件,或加入某种抑制剂造成只利于此菌生长,而抑制其他菌生长的环境,从而淘汰其他一些不需要的微生物,再用稀释涂布平板法或稀释混合平板法或平板划线分离法等分离、纯化该微生物,直至得到纯菌株。
三、实验试剂与器材
牛肉膏蛋白胨培养基;
试管、三角烧瓶、培养皿;
接种环,土样,酒精灯等。
四、操作步骤
每组配牛肉膏蛋白胨培养基250 mL,放在三角瓶中,加热溶解后取2~3 mL加至试管中,每人做一支试管。其配方如下: 牛肉膏3 g、蛋白胨l0g、NaCl 5 g、琼脂15—20 g、水1000 mL、pH —
每组包10个培养皿,待灭菌。
将试管、空的培养皿、剩余的培养基以及10 mL蒸馏水放入高压灭菌锅灭菌于121 oC下20 min。
倒平板:在无菌操作台上,将加热融化的牛肉膏蛋白胨培养基倒平板,并标明培养基的名称。
在试管上贴上标签,注明菌名、接种日期、接种人姓名等。贴在距试管口径2-3厘米的位置。
待培养皿和试管中的培养基冷却凝固后,点燃酒精灯。
接种。
取接种环:右手拿接种环(如握钢笔一样)、在火焰上将环端烧红灭菌,然后将有可能伸入试管的其余部分,均用火烧过灭菌。
环冷却:将灼烧过的接种环伸入菌种管,先使环接触边壁,使其冷却。
取菌种:待

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