文档介绍：汶川地区细叶百合栽培种的快繁体系探索
摘 要:本文探究了汶川地区细叶百合栽培种的快速繁殖体系,通过采用不同种类不同配比的植物生长调节剂处理细叶百合鳞片,研究了细叶百合鳞片扦插的最适处理条件;以细叶百合的鳞片和叶片为外植体,对细,每一条件重复3次,扦插和观测方法同单一植物生长促进剂处理的情况。
以鳞片为外植体的细叶百合组培快繁体系研究
鳞片外植体的消毒和切割
将预处理好的鳞片用75%的乙醇浸泡2min,用无菌水冲洗5次,%的HgCl2浸泡13min,然后用无菌水冲洗5次以清除残余的HgCl2[9],将灭菌后的鳞片每片去除边缘后,×。
初代培养
预实验以NAA搭配KT探究促分化激素水平,/L有少量分化的情况,主要为愈伤组织,并在此基础上,另添加6-BA以促进不定芽的诱导。/L加6-、/L加6-、/L加6- 3种不同激素配比MS培养基上(见表3)。每个培养瓶接种2片外植体,以20片外植体为1组,每一激素条件下做3组重复,置于20~25℃,2000lx光照,每天光照12h的条件下培养,每5d做1次鳞片生长分化情况的观察记录。 小鳞茎诱导生根
将初代培养产生的丛生小鳞茎从组培瓶中取出,分离为适宜大小,以20份为1组,、/L的1/2MS培养基上(见表4)。每一激素条件做3组重复,置于20~25℃,2000lx光照,每天光照12h的条件下培养,每5d做1次鳞片生长分化情况的观察记录。
以叶片为外植体的细叶百合组培快繁初探
将预处理好的叶片每20片分为1组,分别采用75%%HgCl2浸泡5min、10min;75%%HgCl2浸泡5min、10min的消毒条件处理(表5)。每个灭菌条件下做3组重复,,4-[10],置于培养室培养,培养条件同鳞片外植体,7d后统计污染率,10d后统计坏死率,25d后统计分化率。
组培苗炼化栽培
将培养瓶从培养室取出,在室内无阳光直射处放置3d,然后打开培养瓶瓶盖继续培养3d,再将小苗取出洗净根部琼脂,移栽至经消毒的培养基质中,培养基质为泥炭土∶珍珠岩为1∶1[11],置于阴凉处缓苗,30d后统计成活率。
数据统计分析
平均生根数=生根总数/(接种数×成活率);
平均小鳞茎数=小鳞茎总数/(接种数×成活率);
愈伤组织诱导率=(诱导分化外植体数/接种外植体总数)×100%;
扦插成活率=(成活鳞片数/接种鳞片总数)×100%;
分化率=(分化外植体数/接种外植体总数)×100%;
坏死率=(坏死外植体数/接种外植体总数)×100%。
试验数据用Excel进行整理,,多重比较,数据的表示形式为平均值±标准差。
2 结果与分析
不同生长调节剂对细叶百合鳞片扦插繁殖的影响
单一植物生长调节剂处理对细叶百合小鳞茎分化的影响
以细叶百合鳞片为材料,通过不同浓度梯度不同类型植物生长调节剂浸泡处理,以探究生长调节剂对细叶百合鳞片扦插繁殖小鳞茎的影响,扦插40d后对鳞片成活率、鳞片产生的小鳞茎数和生根数做统计,相关结果见表1。从表中可以看出,用15mg/L的GA3浸泡处理的细叶百合鳞片成活率最高,%,但其产生的平均小鳞茎数和平均生根数较其它处理条件偏低;用20mg/L的GA3浸泡处理的细叶百合鳞片的成活率虽只居于第2,但在该条件下每个鳞片产生的小鳞茎数和生根数都是最高的,、,且小鳞茎和幼根生长状况都良好。综合来看,用20mg/L的GA3浸泡处理的细叶百合鳞片产生小鳞茎的数量最多,长势良好,为GA3处理的较佳浓度;用IBA浸泡细叶百合鳞片也有较高的成活率,其中100mg/%,但是用IBA处理的鳞片产生的平均小鳞茎数远低于20mg/L GA3处理的结果,且差异具显著性;而用NAA浸泡处理细叶百合鳞片虽然成活鳞片平均产生小鳞茎数也较高,但是各浓度