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大肠菌群计数检验操作规程
颁发部门
质量部
新订哦订［
友审口
页数
共2页
文件性: .
大肠菌群计数检验操作规程
颁发部门
质量部
新订哦订［
友审口
页数
共2页
文件性质
管理标准峨作标准口技术标准口
文件编码
原编编码
起草
年月日
审核
年月日
批准
年月日
QC
年月日
执行日期
年月日
分发部门
质量管理部、QC
一、目的
建立大肠菌群计数检验的标准操作程序，使操作过程规范化。
二、适用范围
适用于大肠菌群计数的检验操作。
三、职责
1 .检验人员
严格按检验操作规程进行检验。
2 .QC主管
监督检查执行情况。
四、程序
1 .范围
本方法适用于大肠菌群计数（coliforms）的测定
2 .术语和定义
大肠菌群：在一定培养条件下能发酵乳糖、产酸产气的需氧和兼性厌氧革兰氏阴性无芽胞杆菌。
3 .设备和材料
除微生物实验室常规灭菌及培养设备外，其他设备和材料如下：
恒温培养箱：36C±1C,30C±1CO
冰箱：2c〜5C。
恒温水浴箱：46C±TCo
天平：。
均质器。
振荡器。
无菌吸管：1mL（）、10mL（）或微量移液器及吸
无菌锥形瓶：容量500mL0
无菌培养皿：直径90mm。
pH计或pH比色管或精密pH试纸。
菌落计数器。
4 .培养基和试剂
月桂基硫酸盐胰蛋白陈(LaurylSulfateTryptose,LST)肉汤：见附录A
煌绿乳糖胆盐(BrilliantGreenLactoseBile,BGLB)肉汤：见附录A中
磷酸盐缓冲液：
无菌生理盐水：。
无菌1mol/LNaOH:。
无菌1mol/LHCl:。
5才佥验程序
大肠菌群MPN计数的检验程序见图1
图1大肠菌群MPN计数法检验程序
样品的稀释
固体和半固体样品：称取25g样品置盛有225mL磷酸盐缓冲液或生理盐水的无菌均质杯内，8000r/min〜10000r/min均质1min〜2min,或放入盛有225mL稀释液的无菌均质袋中，用拍击式均质器拍打1min〜2min,制成1:10的样品匀液。
液体样品：以无菌吸管吸取25mL样品置盛有225mL磷酸盐缓冲液或生理盐水的无菌锥形瓶（瓶内预置适当数量的无菌玻璃珠）中，充分混匀，制成1:10的样品匀液。
〜，必要时分别用1mol/LNaOH或1mol/LHCl调节。
用1mL无