文档介绍：Sephadex LH-20
中药生物技术
S0620336
刘利
基本内容 1结构 2性质
3应用原理
使用方法 1一般使用过程
2溶剂选择
3再生方法
4污染处理方法
注意问题
基本内容
1. Sephadex LH-20结构特点
Sephadex LH-20是Sephadex G-25经羟丙基化处理后得到的产物。
葡聚糖凝胶中的葡萄糖部分与羟丙基结合成醚键形式。
亲脂性的羟丙基是同时具备吸附性层析和分子筛功能的独特层析介质。
交联葡聚糖凝胶的化学结构
2 Sephadex LH-20性质
交联度小,机械强度低,不耐压,溶胀性大
具亲脂性和亲水性,水及有机溶剂中都能应用
可用于分子筛层析、吸附层析和分配层析
应用范围广泛,适合用有机溶剂分离嗜脂性分子
载样量高,极少需要再生
主要性能参数
分离范围(球蛋白) 100-4000
颗粒大小(微米) 20-150
应用范围胆固醇,脂肪酸,激素,维他命,天然产物
PH稳定性 2-13
最高流速(厘米/小时) 500
3应用原理凝胶层析的分子筛原理
l 分子大小不同混合物上柱; 2 洗脱开始,小分子扩散进人凝胶颗粒内,大分子被排阻于颗粒之外;3 大小分子分开: 4大分子行程较短,已洗脱出层析柱,小分子尚在进行中
吸附原理
吸附:范德华力或产生氢键
反相分配原理
分配:极性与非极性溶剂组成的混合剂(反相溶剂)中起到反相分配的效果
使用反相溶剂洗脱,极性大的化合物保留弱,先被洗脱下来,极性小的化合物保留强,后出柱。
如果使用正相溶剂洗脱,这主要靠凝胶过滤作用来分离。
使用方法
制备凝胶悬浮液
装柱
平衡
上样
洗脱
再生
污染处理