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血凝抑制实验报告三篇
血凝抑制试验报告三篇血凝抑制试验报告一 禽流感血凝和血凝抑制试验可用于血清中抗体水平的监测，也可用于判定未运用疫苗群体的感染状态等。该试验是目前世界卫生组织和国际动物安康96孔90°V型板进展试验，通过反复试验证明：90°V型板相对于110°板及130°板来讲，具有红细胞沉降速度快，产生的凝集图像清楚、结果简单判定等优点。
移液枪的选择及运用：
①单道、多道可调微量移液枪应选择适宜的量程，以便准确度的提高。
②运用时应采纳一档吸液二档排液的方法。吸取液体时，枪头要深化液下缓慢平稳吸液。加缓冲液时
应加在板孔底部。倍比稀释血清时，应每孔至少反复吹吸6次，以便混合匀称，还应留意尽量幸免产生泡沫引起混合不均。加抗原及红细胞时应在板内液面上方加样，以免穿插污染，影响试验结果。
③加样、倍比稀释时应高度集中留意力，以免漏加、重复加样等。
3试剂的保存及配置
禽流感血凝抑制试验所用的抗原、阳性血清应严格遵照说明书的要求进展保存和配置，试验前应提前将其复原至室内温。抗原的保存温度为-20℃，反复冻融会降低抗原的滴度，应幸免反复冻融。
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①应尽量现用现配
②每次运用前应测PH值，以免时间过长而导致PH值发生变更。
③由于PH试纸跨度范围偏大，PH值不易精确介定，因此最好采纳酸度计精确测量PH值，以提高试验的准确度。
④全部试验均采纳同一种稀释液。
1%红细胞的制备
①为幸免有些鸡只的红细胞有自凝现象，因此配制1%红细胞悬液时应最好选择采纳2-3只SPF鸡或未进展过任何免疫过的成年公鸡血液。当然采血的前提条件是要按非常之一采血量比例在一次性注射器中参加抗凝剂，如肝素、枸椽酸钠、柠檬酸钠等。
②采血完毕后最好分装至2ml容量的圆底离心管中，，，离心后，离心管底部红细胞不易与参加的PBS液混匀，易沉积在管底部，达不到洗脱干净的目的。
③经20xx~3000r/min，5~10min，弃去上液和红细胞上层的白细胞薄膜，再参加十倍以上血量的PBS液，上下缓慢颠倒〔切忌用力过大使红细胞裂开〕，使其充分混匀，再离心弃去上清液，反复几次直至上清液清亮透亮为止。
④在加红细胞过程中还须不断轻摇以确保红细胞匀称，使其每孔参加一样数量的红细胞。
⑤制备好的红细胞液假如放置后上清液变红，说明有溶血，不行再运用。
①先做血凝试验测定效价，以抗原与红细胞完全凝集的孔为1HUA抗原，配制4HUA抗原应往前推算两孔，即除以4后的值。
②每次做试验前，必需重新检测禽流感抗原的血凝效价，以免效价发生变更而导致抗原稀释倍数不精确，从而导致试验结果不精确。
③为保证配制的抗原精确，还要进展抗原回滴试验。详细方法：做二排抗原回滴，在两排的第1~8孔各加25微升PBS，取4HAU抗原25微升加在两排的第1、第2孔，混匀，从第2孔倍比稀释至第4孔，弃去25微升，另一排同样。从第2至第8孔补25微升PBS，以保持75微升总量不变，另一排同样。两排的第1至第8孔各加25微升1%红细胞，震荡10秒钟。静置30分钟视察结果。这样在第1孔为4HAU抗原，第2孔为2HAU抗原，第3孔为1HAU抗原，第4孔为1/2HAU抗原，均为75微升总量，第5至第8孔为空白参照。假如抗原回滴试验不成立，应相应调整抗原浓度直至回滴试验成立。因为假如抗原浓度过高，那么所测定的抗体效价水平偏低，假如抗原浓度过低，那么所测定的效价偏高。所以不调整抗原浓度至试验成立的话会对结果有很大影响。
第 6