文档介绍:多肽溶解指南
尊敬的客户:
您好!感谢使用我公司的多肽合成服务,以下为多肽溶解建议,请参考。
没有绝对理想的一种溶剂可以做到既能溶解所有多肽,又能保持它们的完整性并且与生
物学检测相一致。多肽的溶解取决于其物理特性。多肽溶解指南
尊敬的客户:
您好!感谢使用我公司的多肽合成服务,以下为多肽溶解建议,请参考。
没有绝对理想的一种溶剂可以做到既能溶解所有多肽,又能保持它们的完整性并且与生
物学检测相一致。多肽的溶解取决于其物理特性。氨基酸分为酸性、碱性、极性、非极性及 疏水性等。
因此,溶解方法还需要结合溶剂及多肽特性等因素进行选择,实验前先进行小量试验, 方法可行后再大量溶解。
a) 从冰箱中取出多肽样品并放置 20min ,回到室温后离心使其沉到管底,再打开进行溶解。 b) 加入相应的溶解试剂后,震荡混匀。
c) 溶解成功后,可以加入水或 PH5~7
的缓冲液至终浓度(1~2mg/ml )。
d) 溶解之后的多肽储存于-20 ℃,长期保存建议储存于-80 ℃。 多肽酸碱性预测
类型
酸性
碱性
中性
氨基酸
AspD,GluE,C 端的羧基-COOH
ArgR,LysK,HisH,N 端的氨基-NH2
除上述两种的其它氨基酸
赋值
-1
+1
0
i.
ii.
计算结果为负值,则多肽呈酸性,可以先用水溶解;如果不溶,尝试使用 13% (v/v)
氨水溶解,然后将多肽稀释至需要的浓度。对于含有半胱氨酸的多肽,要避免使用氨 水,因为 PH 碱性条件下会促使二硫键的形成。
计算结果为正值,则多肽呈碱性,可以先用水溶解;如过不溶,尝试使用10%~30%
的乙酸溶解;如果一点都不溶,建议用 DMSO