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文档介绍

文档介绍:实验室常用溶液的配置
Amp+/Kan+: 贮存液浓度为50mg/mL
称取500mgT 10mLe纯水中溶解,抽滤后1mL分装到离心管中,于-30C冻存
X-gal :贮存浓度为 20mg/mL
称取20mg X-gal溶于1mL倍即可
30%丙稀酰***
1L 剂量
丙烯酰*** 290g
N,N’ -亚***双丙稀酰***10g
溶于600ml蒸储水中,力口热至37c溶解,补足体积至1L,过滤,且pH不大于
1 M Tris-Cl ()
g Tris碱溶解于400ml蒸储水,溶解后调pH值,总体积为500ml
M Tris-Cl ()
Tris 碱溶解于400ml蒸储水,溶解后调pH值,总体积为500ml。加约浓盐酸,再调整 到 500ml 体积 1M DTT
用20mL L乙酸钠溶液(pH=)溶解DTT,过滤除菌后分装
考马斯亮蓝R-250 染液
在90mL甲醇:水(1:1 )和10mL冰乙酸混合液中溶解考马斯亮蓝 R-250,过滤后室温保 存
蛋白酶K( 20mg/mL)
灭菌的50 mM Tris ( pH ), mM乙酸钙溶解,配置成浓度为 20 mg/mL的溶液,-20 C保 存
流式缓冲液PBS+5% FBS+% sodium azide
Water 45 mL
209#氮钠50仙L
10*PBS 5 mL
FBS mL
文献常见配方: PBS+9 BS(A5-109 FBS) +9 sodium azide 酸酐
称取50 g重铭酸钾(KCrO)溶于80mL>蒸水中,90c中溶解2h,每半小时搅拌促进溶 解,溶解完成后,加入1000mL硫酸,分装于2个瓶子中。注意使用过程中,如果其中一 瓶的效果不好,不要混合使用。使用 5 次,就要重配。
滴管
酸酊中浸泡24h,自来水冲洗至无明显可见颜色,自来水正反面各20遍,双蒸水正反面
各 20 遍,复印纸中包裹,烘干,加棉花塞和胶头,单独包装,灭菌,烘干。
双抗(青霉素和链霉素)
g链霉素和80W U青霉素,一起溶于 8ml PBS,单位分别为10A5 ug/ml和10A5 U/ml , 然后稀释10倍,分别为10A4 ug/ml和10A4 U/ml,使用时,按照1啕口入,分别为100 ug/ml 与 100 U/ml
培养基 I
2% FCS 1烟抗,128uL/40mL 肝素钠,RPMI 1640
成关主t II
培养基 II
% FCS 1啾抗,128uL/40mL 肝素钠,RPMI 1640
完全培养基
10% FCS (5% FCS+5%t 血清),1烟抗
LPS
称取2mg LPS容于1mL PBS^,滤膜过滤,硅化离心管,-20C保存
1*Turk 染液
Gentian Violer (结晶紫) 50mg
Acetic Acid (冰乙酸) 5mL
Water 495mL
1%巴比妥钠
1g巴比妥钠溶于100mL的PBS中,充分混匀,避光保存(80 ug/g用量)
诱导小鼠腹腔巨噬细胞所需溶液
硫代硫酸盐肉汤培养基(Thioglycollate broth) :
称取 3 g ,加入到 100 ml 纯水中,高温121 ℃灭菌 15 min ,然后冷却到室温,再重复2
次,进行老化操作。此时已