文档介绍：乙肝宁颗粒抗乙型肝炎病毒的体外实验研
究
摘要：目的探讨体外乙肝宁颗粒抗乙肝病毒活性。 方法 将不同浓度乙肝宁颗粒与HepG 2. 9d,以拉米夫定为阳性对照药，以MTT比色法观察药物细胞 毒性；用ELIS法测定细肝宁颗粒组外，其 余组别与细胞对照组比较P20,对HBsAg的SI为＞24,表明 乙肝宁颗粒能够显著抑制对HepG 2. , HbsAg,具有较强的体外抑制HepG 2. 的作用，提示乙肝宁颗粒在体外实验中有抑制HBV的作用。
4讨论
乙型肝炎是一个世界性的公共卫生问题。中国每年约有 35万人死于慢性乙肝相关的疾病[15-16] o目前治疗乙型肝 炎主要采用抗病毒治疗，其药物主要包括干扰素和核昔类似 物两类，亦取得了一定疗效。但由于其毒副作用导致应用受 到较大的限制，因此积极开发安全有效，毒副作用小，疗程 短，费用低的抗HBV药是目前亟待解决的问题，而中医药是 我国的特色和优势，对治疗慢性乙型肝炎积累了一定的经 验，发现了不少有效的单方或者是复方，为筛选理想的抗HBV 药物提供了思路和希望。
本实验采用HepG 2. ，观察受 试药物对乙型肝炎病毒的HBsAg、HBeAg分泌的抑制作用以 及对病毒核酸的抑制作用。HepG 2. 性基因片段与含HBV DN重组质粒转染人肝癌细胞系 (HepG2)的2. 2. 15细胞系，能在体外长期培养，稳定、 高水平地分泌HBV颗粒(Dane颗粒)、HBsAg, HBeAg以及 HBVDNA,并能产生大量复制中间体，再现
HBV在肝细胞中 的复制和表达［17］。用该细胞系进行抗HBV药物筛选，结果 可以比较准确地预测药物在人体内的作用，是目前国内外公 认和常用的体外评价HBV药物的细胞模型，现已成为申报抗 新药必须做的体外实验模型［18-21］ o
实验中以拉米夫定（3TC）为阳性实验对照药物，是目 前治疗病毒性肝炎的常用药物［22-23］ o其主要作用机制是 进入细胞内后磷酸化成拉米夫定三磷酸盐（L-TP）,与脱氧 胞昔三磷酸（dCTP）竞争结合位点，抑制HBV逆转录酶的活 性，阻断合成新HBV DNA的链化，达到抑制HBV复制的目的 ［24］。但存在治疗乙肝时用时长，易产生耐药性，毒副作用 大，停药后易反弹等问题。实验结果表明，3TC抗HBV病毒 的效果虽然优于乙肝宁颗粒，但其细胞毒性亦比乙肝宁颗粒 强得多。乙肝宁颗粒由黄芷、白花蛇舌草、茵陈、首乌、丹 参、茯苓、白芍、党参等组成。黄芷补气升阳、利水消肿； 白花蛇舌草清热解毒，利湿；茵陈清热利湿、退黄；金钱草 清利湿热，利水通淋，除湿退黄；首乌养血滋阴、解毒通便; 党参健脾益肺、养血生津；白芍平肝柔肝、缓急止痛；茯苓 利水渗湿、健脾和胃；丹参活血祛瘀、清心除烦。此方共成 调气健脾、滋养肝肾、利胆清热、活血化瘀之法则，在抑制 病毒复制的同时提高机体免疫力，降低药物对机体的损伤， 并可促进正常肝细胞的恢复与再生。 采用
HepG2. ，实验条件易于控制、研究 结果均衡性较好。但离体体外实验不能完全反映体内所特有 的免疫调节和药物在体内的代谢情况。因此，此实验研究虽 显示乙肝宁颗粒具有较好的对