文档介绍：单克隆抗体
——1984 年诺贝尔奖
生物031-王欢
主要内容
一、获奖者简介
二、理论依据
三、发展过程
四、具体实验
获奖者
丹麦科学家杰尼、德国科学家科勒、阿根廷科学家米尔斯坦因发现生产单克隆抗体的原理而共同获得诺贝尔生理学或医学奖。
Niels K. Jerne
1911–94, British-Danish 免疫学家, b. Danish State Serum Institute工作(1945–55) ,为世界卫生组织首席官员(1956–62).他发展“network theory”解释人类免疫系统产生抗体对抗疾病的互动过程.()
es . Kohler
1946–95, German免疫学家, . Univ. of Freiburg, Milstein (1974–76) 在the Laboratory of Molecular Biology in Cambridge, England. 工作, 在哪里他们发展一项技术藉由融合产生抗体的细胞和快速生长的细胞因而产生大量的单株抗体,这项产生抗体的技术被全世界广泛的接受. ()
Cesar Milstein
1926–2002, Argentine 免疫学家, . Cambridge Univ., es Kohler (1974–76) 工作在the Laboratory of Molecular Biology in Cambridge, . 这项产生抗体的技术被全世界广泛的接受. ()
理论依据
抗原分子上可以诱导出抗体的部位或片段,特称之为抗原决定基(antigenic determinant);一个抗原分子上通常都有许多处抗原决定基,而每个决定基至少都可诱生出一种抗体;因此在传统抗血清中,都含有许多种不同的抗体,分别对抗这些不同的决定基。
对于分子构造相似的抗原,由于它们含有共同或相似的抗原决定基,所产生的抗血清对这两种相似的抗原都会产生反应;因此在检定此类抗原时,其专一性不很理想,常常会出现假阳性,也称为交叉反应性。同时又由于免疫动物的个别体质不同,对抗原的反应也有相当的差异,以致无法准确控制所得到每批抗血清效价的高低。
血清中的每一种抗体是由单一种 B 细胞所分泌产生,若能把此 B 细胞由脾脏中挑出来,单独培养成细胞株,则可得单一种类的抗体,只会对一种抗原决定基反应,其专一性极高。大量培养此细胞株,即可有质量一定、纯度均一的抗体,此即为单株抗体。
然而 B 细胞不易在培养基中生长,虽然有人一直努力,想找出在体外培养脾脏细胞的条件,但结果均不甚理想,因此上述想法不易达成。
癌细胞的生长不受控制,很容易在培养基中生长,有很多已经建立好的癌细胞株,其生长特性均已了解; 若把癌细胞永续生长的特性,利用细胞融合法导入可生产有用抗体的 B 细胞中,则得到可在培养基中永久生长的 B 细胞株,此即融合瘤细胞株。
发展过程
1955年,Niels K. Jerne 便提出著名的免疫天择论,指出每个人体内都具有大量各式各样的抗体;当外来抗原进入人体时便会选择最适合的抗体来反应(也就是结合),而此一新结合的抗原抗体分子,又会刺激人体生产更多同类型的抗体。换言之,抗原在免疫反应里的作用彷佛模板,可供人体打造大量相对应的抗体。这个说法推翻了早先学界流行的想法,奠下现代免疫学的理论基础,(Macfarlance,1960年诺贝尔生理医学奖得主)的选殖(clone)理论的前导。
1974年春天,es Jean的刚从瑞士的巴塞尔免疫学院得到博士学位,他选择了由Cesar Milstein负责的英国剑桥大学分子生物研究室,继续博士后研究。
es Jean的博士论文是研究抗体的基因突变,而Cesar Milstein则是一直从事抗体遗传学的研究,他与Cotto曾将大鼠(rat)与小鼠(mouse)的淋巴细胞融合在研究抗体的产生情形,他同时也探讨基因突变后抗体受到的影响。
1969年,Niels K. Jerne前往瑞士,担任巴塞尔免疫研究所所长。这段期间,它又把多年研究心得整理出两大理论,一是关于免疫细胞生成机制的诠释,work theory),而后者正是让他获得诺贝尔奖的主因。这两个重要的理论分别是在1971及1974年提出,从此改写免疫学理的基础。