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抑制素A的克隆表达以及单克隆抗体的制备与鉴定.pdf

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文档介绍

文档介绍:南方医科大学级硕士学位论文抑制素目寺”泶镆约暗タ寺】固宓闹票赣爰论文评阅人课题来源:广东省重大科技攻关项目学位申请人教答辩委员会主席答辩委员会成员免疫学李明教授余新炳教授洪岸教授何庆瑜教授李英杰教授马骊教授吴忠道教授孙晗笑教授董文其教授专业称指导师李月年日广州名琾
\嘴黼抑制素目寺”泶镆约暗タ寺】固宓制备与鉴定硕士研究生:李月指导教师:李明摘要键籗—偶联构成,属于转化生长因子用是抑制垂体产生卵泡刺激素。浚雅菀种扑匾苍谛韵僦型ü苑置诤抑制素且恢大分子糖蛋白肽类激素,由礁鲅腔远,慷嚯募易濉F浠咀旁分泌的形式调节卵泡细胞的分化和甾体的生成;大多数循环抑制素由性腺产生,另外它们在许多性腺外的组织,包扩脑,肾上腺,骨髓,胎盘都有表达并且在局部都有一定的调节作用【啤R种扑谹不仅与卵泡发育【和卵巢肿瘤【泄囟且近年来还发现它可以作为孕中期唐氏综合症筛查的一项指标【—。唐氏综合症痵侨死嘧钤绶⑾智易畛<某H旧宀。彩窃斐啥童先天性智力低下的重要原因之一【’L剖衔廾飨缘募易迨访椤浚扛鲈懈径有生出该患儿的可能性,至今尚无有效的治疗手段,所以产前诊断就显得较为重要,目前开展的羊水穿刺及绒毛活检仅限于高危人群【】,仅能检出%的唐氏患儿,此外羊水穿刺及绒毛活检均为侵入性检查,不适于群体检查,为了能最大限度减少产前有创检查降低唐氏患儿的的出生率,产前的血清学的筛查已被广泛用于临床。现在妊娠中期的血清学检测主要采取娜J笛【】,但是这些标志物的血清水平在正常和非正常人群都有所重叠,所以,新的标志物的发现和应用综合的检测方案是提高检出率的有效的方法。自从发现抑制素难G逅皆诨秤刑剖匣级脑懈镜难G逯械乃礁哂谡H焉锖螅制素驯蛔魑<觳馓剖献酆现⒌囊桓鲇行У谋曛疚铩’酆险魅焉镏心秆1昙俏锱ǘ缺浠粕胁磺宄ザ锘蛱硕士学位论文
制素瘸煞种饕@醋蕴ヅ潭皇翘R种扑谹作为’酆险髟兄儿胎盘产物,减少,而胎盘产物;增加,证实了母体血浆中抑期血清筛查的第霰昙俏铮谌焉锸保种扑谹主要由胎盘分泌并且有活性的二聚体的形式谘R褐械乃矫飨陨摺H焉锴叭鲈轮蠨的血清水平升高随后大约在第周下降,【】。它的这种稳定分泌周期使募测更加优化于其它的一些产前诊断指标。自从检测到在怀有唐氏综合症的产妇血清中抑制素乃礁哂谡T懈镜牧奖痘蚋珼已经和其他产前诊断的标志物都作了比较和对照,发现在妊娠的中期联合梢越检出率提高八个百分点达到%,┐卧戮谩5钦庋玫结果可能存在误差,和其他血清标志物相比较,乃皆谌焉锏牡诙偷谌个月不会随着妊龄的变化而有很大的波动,这在研究更可靠的数据去评价唐氏综合症时,它有很大的优势去解释这些结果,并且不会被不正确的妊龄所影响随着现在人们对唐氏综合症的危害的了解,大家都希望能在没有危险的情况下进行早期诊断,早期终止妊娠。所以,又有实验室用:螻琍瓵,辛松覆椋苯岷夏炅淙艏由螪队则可以使早期诊断率提高到%。早期抑制素牟舛ㄔ诩觳釪和堑ノ坏挠卫胄问街浯嬖谝欢ɡ难,因此在检测结果中出现了许多不确定的值浚撬孀耪攵訢的特异性抗体的出现使得募觳獠辉谑悄咽隆O衷谖ㄒ荒懿舛ㄒ种扑谹皮克水平的方法仍是免疫测定法【U庵址椒ǘ家驯恢な悼梢杂美刺匾煨缘募觳馊死嘌=乃剑庵址椒ǘ际撬ḿ行拿噶C庖呶绞笛椤随着这些检测技术的发展,使得各个实验室的筛查结果也有了很大的差异,有报道说在比较怀有唐氏的孕妇和正常的孕妇抑制素乃绞狈⑾。这些差异除了实验时的差异外”浚种扑谹的检测方法的准确性现在还中文摘要【】Ⅱ
没有一个真正的金标准,并且在从组织中提取的和重组体的纯化都存在一定的不均一性,所以还需要有更特异,更敏感的检测方法并且使检测的指标标准化。另外,我国用于检测抑制素腅试剂盒也仍多是引进国外的进口产品,但是这样就大大增加了检测成本,阻碍了其在临床的普遍应用,而且在前期工作中我们已经研制出了、旨觳馐约梁校晕颐且蚕M芄谎制出特异性强的国产化的检测试剂盒以便和上面三种指标联合应用,更好的推动唐氏综合症的临床检测。‘为此,本课题拟通过制备抗抑制素牡タ寺】固澹=徊降奶剖献酆现的筛查打下基础,进一步去评价抑制素朐谔剖献酆现⒄锒现械牟钜旒凹壑担了解检测血清抑制素欠裨诿舾行院吞匾煨陨嫌庞谄渌谋曛疚铩踟。探讨其在唐氏综合症诊断中的可靠性和可行性。因为抑制素谘分胁唤鲆远厶宓幕钚孕问酱嬖诙一够嵊行矶辔粗功能的小分子形式【】,这就使得我们想找到一个能够针对它的更有特异性的检测方法。蛋白质的免疫原性主要是通过表位体现的,准确预测赴砦徊唤鲇兄基础免疫学研究,也有助于疫苗和抗体的研究开发,有助于疾病的治疗与诊断。本研究一方面从胎盘中分别成功扩增并克隆出抑制素难