文档介绍：第一课
第一部分：实验课要求
第二部分：微量移液器的使用
第一部分 分子生物学实验课要求
1，课前预习：预习实验原理、步骤，思考可能的实验结果；
2，不无故旷课，不迟到早退；
3，保持课堂安静；
4，中途不随意离开教室；
第一课
第一部分：实验课要求
第二部分：微量移液器的使用
第一部分 分子生物学实验课要求
1，课前预习：预习实验原理、步骤，思考可能的实验结果；
2，不无故旷课，不迟到早退；
3，保持课堂安静；
4，中途不随意离开教室；
5，保管好各自实验器材，实验结束仔细检查，遗失要及时报告；
6，严格按照老师的要求完成实验；
7，认真完成实验报告；
8，成绩：40%平时成绩（预习，操作，实验报告等），30%操作考试，30%笔试。
第二部分 微量移液器的使用
根据取用溶液体积选用适当量程的微量移液器
P20     1 ~ 20
P200    21 ~ 200
P1000   201 ~ 1,000
一个完整的移液过程包括：
容量设定
安装移液头
预洗移液头
吸液
排液
卸去移液头
每一个步骤都要遵循操作规范。
容量设定
从大值调整到小值时，刚好即可。
从小值调整到大值时，需要调超过三分之一圈后再返回，这是因为计数器里面有一定的空隙，需要弥补。
不要将按钮旋出量程，这将导致移液器损坏。
吸液头安装
正确的安装方法是：把白套筒顶端插入吸液头，在轻轻用力下压的同时，把移液器按逆时针方向旋转180度。
切记用力不能过猛，更不能采取剁吸液头的方法来进行安装，那样做会对移液器造成不必要的损伤。
预洗吸液头
安装了新的吸液头或增大了容量值以后，应把需要转移的液体吸取、排放两到三次。这样做是为了让吸液头内壁形成一道同质液膜，确保移液工作的精度和准度，使移液过程具有重现性。
其次，在吸取有机溶剂或高挥发液体时，挥发性气体会在白套筒室内形成负压，从而产生漏液的情况，这时就需要我们预洗四到六次，让白套筒室内的气体达到饱和，负压就会自动消失。
卸掉吸液头
一般用力下按吸液头推出器即可卸掉吸液头。
如吸液头安装过紧，则可用手卸除。
将吸液头丢弃到合适的废物收集器中。
7. 如不使用，将移液器调到最大量程。
反向移液法
在转移高粘度液体、生物活性液体、易起泡液体或极微量液体时，很容易导致体积误差较大。为了提高移液准确性，建议采取反向移液法。
按下按钮至第二停点，将吸液嘴没入液面下，轻缓松开按钮回原点。
将吸液头在容器壁上停靠一下，以去除多余液体。
将吸液头紧贴容器壁，轻按按钮至第一停点，排出液体。
继续按住按钮，将留在吸液嘴中未被转移的多余液体返回原来容器或随吸液头丢弃。
常见的错误操作
采取剁吸液头的方法来进行安装吸液头。
直接按到第二停点吸液。
吸液时，移液器本身倾斜，导致移液不准确。
吸液或排液时速度太快。
排液时未按到第二停点，吸液头中有残液。
平放带有残余液体吸液头的移液器(应将移液器挂在移液器架上)。
用大量程的移液器移取小体积样品(应该选择合适量程范围的移液器)。
使用丙酮或强腐蚀性的液体清洗移液器。
不经常检查移液器工作状态。
检查移液器工作状态
测漏
吸取满量程的纯净水，将吸液头朝下悬垂20秒，观察是否有液体下滴。如果有，说明移液器出现了漏气的情况。
查找故障原因
首先，检查吸液头安装是否到位。
检查白套筒的端口部份（即白套筒与吸液头接触的部份）是否有刮痕。
再检查白套筒与手柄之间的连接螺帽是否松动。按动排放按钮，感觉是否顺畅，听是否有噪音。
观察排放杆是否有弯曲。
旋转调节按钮，观察计数器的读数。
如果上述情况正常，说明密封圈或活塞组件有损坏，需要修理。
检查移液器工作状态
检查吸量准确性
吸取一定量的纯净水到微量离心管中，通过分析天平称量确定移液器的准确性。
如移液器吸量不准确，应及时请技术人员校正。
参考书：《精编分子生物学实验指南》[美] ，颜子颖等译
请预习下周实验《碱裂解法小量制备质粒DNA》
实验报告：请抄写本讲第二部分 微量移液器的使用