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显微镜标本切片的制作方法.docx

上传人:shugezhang2 2022/6/5 文件大小:7 KB

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显微镜标本切片的制作方法.docx

文档介绍

文档介绍:涂片、铺片、磨片标本的制备
涂片标本的制备;涂片(smear)法是常用的一种方法,如血液等可直接涂于载玻片上制成涂片标本,干燥 后进行固定、染色及封固。
铺片标本的制备;(stretched preparation)法用于疏松结缔组织、涂片、铺片、磨片标本的制备
涂片标本的制备;涂片(smear)法是常用的一种方法,如血液等可直接涂于载玻片上制成涂片标本,干燥 后进行固定、染色及封固。
铺片标本的制备;(stretched preparation)法用于疏松结缔组织、神经等柔软组织或肠系膜等薄层 组织,可将其铺于载玻片上,撕开、展平制成铺片标本,待干燥后进行固定染色。
磨片标本的制备;(ground section)法是用于坚硬组织的标本制作,如骨和牙等坚硬组织除用酸(如 稀***)脱钙后再按常规制成切片标本外,也可直接将其磨成薄的磨片标本进行观察。
切片标本的制备
观察机体各部的微细结构时,首先要制成薄片,就是切片法,其中以石蜡切片(Paraffin section)最为 常见。其制备程序大致如下:
取材与固定:取材要尽量以人体材料为主,辅以动物材料。取得新鲜材料后, 厘米大小)立即投入固定剂(fixative)中进行固定,使组织中蛋白质迅速凝固,防止组织自溶或***, 以保持生活状态下的结构。常用的固定剂有甲醛、酒精、醋酸、苦味酸、饿酸等。
脱水(dehydtation)、透明(clearing)与包埋(embedding):把固定好的材料用乙醇将组织内的水分 脱掉,经二甲苯透明后,再浸入巳融化的石蜡中进行浸透、包埋。
切片(section)与染色(staining):用切片机(microtome)切成5〜10“m的薄片,贴于载玻片上, 脱蜡后进行染色,最常用的染色法是苏木精(hematoxylin,haematoxylin)和伊红(eosin)染色简称HE染 色。配制后的苏木精染波呈碱性,可使细胞核内的染色质及细胞质内的核糖体等染成蓝紫色,称嗜碱性
(basophilia);伊红是酸性染料,可使多数细胞的细胞质染成粉红色,称嗜酸性(acidophilia);耐碱 性和酸性染液亲合力都不强的,称为中性(neutroPhilia);
封固(mounting):切片经脱水、透明后,于切片上滴加中性树胶和盖片进行封固后,贴标签备用。
除HE染色外,还有多种染色方法。有的能特异性的显示细胞内某些结构,如使用雷锁辛品红
(resorcin-fuchsin)染液显示组织内的弹性纤维;有的细胞经重铭酸盐处理后,呈棕褐色,称嗜铭性
(chromaffinity);有的组织成分经***银处理时,可使