文档介绍：医学微生物学实验
主讲：马玉龙
Tel:**********
Email:******@
新乡医学院微生物学教研室：3029130 科教科：3029945
编果。
编辑ppt
双糖铁培养基上各菌的生长现象
编辑ppt
冲洗
染色完成之后，在涂片区滴上香柏油使用油镜观察实验结果
（3）革兰染色方法与步骤
1、细菌涂片的制备
涂片 干燥 固定
2、染色
初染（结晶紫） 媒染（卢戈氏碘液） 脱色
（95%乙醇） 复染（稀释石碳酸复红） 吸水纸
吸干
1min
1min
30s
30s
冲洗
冲洗
冲洗
编辑ppt
（4）伤寒杆菌玻片凝集试验
原理：
当颗粒性抗原与其相应的抗体特异结合时，在电解质存在下，两者比例合适时，可出现凝集颗粒，此现象称凝集反应。
编辑ppt
试剂与器材
沙门氏菌属A—E群多价O血清，
SS平板上菌落，
玻片、消毒缸、酒精灯，记号笔等。
方法
，用记号笔划分成两部分。用移液枪分别在两边加沙门氏菌属A-E群多价O血清8微升。
（黑色或无色菌落，以及粉红色大菌落）与血清混合成均匀乳状(注意：取菌量不宜过多，使悬液呈轻度乳浊即可)。
，经1-2min后观察结果。
编辑ppt
注意事项：
注意涂菌时，标明菌落，以免混淆产生错误结果。
记录结果之后，将玻片放入含消毒液的指定容器内，切勿任意放置或冲洗。
结果观察
液体变清，并有乳白色凝集块出现者为阳性。
液体仍然混浊，无凝集块出现者为阴性。
如待检菌与沙门氏菌属A-E群多价O血清发生凝集，则该菌为沙门氏菌属。
编辑ppt
（5）结果判断
SS平板：菌落的形态，颜色；
双糖铁培养基上生化特点；
革兰染色：形态，排列，染色特点；
玻片凝集试验结果
编辑ppt
本次实验所做内容
杆菌鉴定
⑴观察菌落特征（SS平板）
⑵取可疑菌落做革兰染色 4片/台
⑶将可疑菌落接种于双糖铁培养基上（穿刺+斜面 ），37度
培养24小时，观察结果. 1支/台
⑷伤寒杆菌玻片凝集试验
编辑ppt
二 药敏试验（）
编辑ppt
目的要求
编辑ppt
原理
含有定量抗菌药物的纸片贴在已接种测试菌的琼脂平板上，纸片中所含的药物吸取琼脂中的水分溶解后便不断地向纸片周围区域扩散，形成递减的浓度梯度。在纸片周围抑菌浓度范围内的细菌的生长被抑制，形成透明的抑菌圈。抑菌圈的大小反映测试菌对测定药物的敏感程度。
编辑ppt
主要材料
：
青霉素 ***霉素 链霉素 庆大霉素
编辑ppt
方法
标记分区
密涂接种
贴片
培养
结果观察
编辑ppt
底部观
编辑ppt
分三次接种，每次取一环。第一次密涂接种后旋转60度二次密涂接种，然后同方向旋转60度后再次密涂接种。
顶部观
编辑ppt
底部观
编辑ppt
置37℃温箱，
倒置培养18h-24h
编辑ppt
青霉素
链霉素
庆大霉素
***霉素
五、 结果 抑菌圈
抑菌圈直径
编辑ppt
注意事项
接种时均匀密涂
贴片时，用无菌镊子轻轻触压药物纸片使之与培养基充分接触
贴片后不能再更改纸片位置
镊取药物纸片时一旦掉到培养基表面，则继续保持其位置，切勿镊起重新放置，以防不同抗生素交叉影响
整个贴片过程应在15min内完成
编辑ppt
一、实验目的：
1、掌握细菌涂片标本的制备
2、掌握抗酸染色的原理和方法
三 抗酸染色
编辑ppt
分枝杆菌的细胞壁内含有大量的脂质，主要是分枝菌酸，它包围在肽聚糖的外面，所以分枝杆菌一般不易着色，要经过加热和延长染色时间来促使其着色。但分枝杆菌中的分枝菌酸与染料结合后，就很难被酸性脱色剂脱色，故名抗酸染色。
齐-尼氏抗酸染色法是在加热条件下使分枝菌酸与石炭酸