文档介绍：1 、检测指标: DNA 倍体分析、 DNA 含量分析、细胞周期、细胞凋亡;细胞表面抗原分析:淋巴细胞免疫分型、白血病及淋巴瘤免疫分型、血小板相关抗体分析、 PNH 相关抗原检测( CD55/CD59 )、胞内细胞因子检测等。 2 、样本及来源: 1) 细胞数量达到检测所需(细胞周期 1x10 6 、细胞凋亡 3x10 6), 生长良好,无污染,附有细胞生长照片,注明实验检测项目所需试剂盒;来源于人、小鼠、大鼠或其它。 2) 外周血: EDTA 或肝素抗凝全血, 5ml 左右;来源于人、小鼠、大鼠或其它。 3) 试剂:部分常用荧光探针,如 PI 等,我公司可免费提供;特殊标记物,如 CD 抗体等,用户须另行购买,我公司可以代购;用户所提供抗体应可与样本发生特异性识别反应。 4) 样品包装要求:细胞培养在培养瓶中或操作前样本于合适的条件保存。 3 、收费标准: 编号规格价格(￥) J-FCM-1 单色标记 30/T J-FCM-2 双色标记 50/T J-FCM-3 三色标记 60/T 检测说明: 1、用户需要进行流式细胞仪检测时须提前预约, 同时说明实验目的、方法等。最低收费 300 元。 2、我公司在正式接受实验委托一周内交付实验结果。所提供实验结果忠实于样本的实际情况。 3、用户须一次性全额预付实验费。 4、由用户提供的样品或试剂所致的实验问题由用户负责。 5、请在表中说明检测具体要求,由于填写资料不详所致任何问题由用户负责。 6、请在送样的同时提供样本来源及处理方法等信息,样品检测后原则上本公司不负责保存。附:流式细胞术检测样品推荐制备方法 A. 直接标记抗体( FITC 标记抗体): (1) 收集 1× 10 6 个细胞, 800rpm 离心 5min ,4℃以上冷 PBS 洗一次。(2) 用 4% 多聚甲醛 1ml 室温固定 40 分钟, 800rpm 离心 5min 去上清。加 2ml PBS 重悬洗涤细胞, 800rpm 离心 5min 。(3) 用 1ml 含 5% 人血清的 PBS 重悬细胞, 冰上孵育 10min , 800rpm 离心 5min 去上清。加入 200u l 含 %BSA 和饱和剂量的荧光标记抗体(5× 10 5 个细胞/20u l 抗体)的 PBS , 避光冰上放置 30min, 离心弃上清。加入 200ul 1% 多聚甲醛固定,待测即可。(4) 用流式细胞仪检测荧光值, 每管计数 10, 个细胞。 B. 未标记抗体间接免疫荧光标记法: (1) 收集 2× 10 6 个细胞,用冷的 PBS 2ml 洗涤细胞一次, 800rpm 离心 5min 。(2) 用 2ml 4% 多聚甲醛室温固定细胞 40min,800rpm 离心 5min ; 2ml PBS 重悬细胞, 800rpm 离心 5min ; (3) 用 1ml 含 %Triton-X100 和 5% 血清的 PBS 重悬细胞,冰上放置 10min,800rpm 离心 5min 。(4) 加入饱和剂量未标记抗体,冰上放置 40min,800rpm 离心 5min ,用 2ml 冷的 PBS 重悬细胞, 800rpm 离心 5min ,洗去未结合一抗,重复一次。(5) 加入荧光标记( FITC ) 标记的二抗, 冰上避光放置 40min