文档介绍:实验概要
本文介绍了吞噬细胞吞噬功能检测(Assay of the Phagocytic Function of
Phagocyte)实验的基本原理、操作步骤及注意事项等。
实验原理
吞噬细胞
实验概要
本文介绍了吞噬细胞吞噬功能检测(Assay of the Phagocytic Function of
Phagocyte)实验的基本原理、操作步骤及注意事项等。
实验原理
吞噬细胞具有对异物(细菌、绵羊红细胞、鸡红细胞等)吞噬和消化的功能,
在机体非特异性免疫中发挥重要作用。
小鼠腹腔内注射硫代乙醇酸钠,可刺激巨噬细胞的聚集。四日后小鼠腹腔内注入羊
红细胞悬液,一小时后解剖收集腹腔吞嗜细胞,染色、镜检可观察对羊红细胞的吞
嗜现象。通过计算吞嗜百分比或吞噬指数可测定吞噬细胞的吞嗜功能。
主要试剂
1. PBS 缓冲液
2. 3%硫代乙醇酸钠
3. 1%羊红细胞悬液
4. 瑞氏染液
5. 甲醇
主要设备
1. 解剖器材
2. 注射器
3. 尖吸管
4. 橡皮吸头
5. 小试管
6. 载玻片
实验材料
ICR 小鼠
实验步骤
1. 实验准备:用无菌注射器吸取 3%硫代乙醇酸钠 3ml,注射于小鼠腹腔
内。
2. 四日后,注射 1%羊红细胞悬液 1ml 于小鼠腹腔内。
3. 注射 1 小时后,将小鼠用颈椎脱臼法处死,解剖暴露腹腔,于腹腔靠上部位,
用镊子轻轻夹起腹膜,将腹膜剪一小口,用尖吸管注入 5ml 预温的 PBS,同时用手
反复揉搓腹腔约 1—2 分钟,以便尽可能多地冲洗出小鼠腹腔的吞噬细胞。
4. 用尖吸管吸取腹腔液,置一洁净试管内。
5. 用尖吸管将腹腔液吹打均匀(尽量避免产生气泡),吸取一滴滴于载玻片上,加
盖玻片镜检。
6. 观察结果,也可以将腹腔液涂片,平放于湿盘内,37℃,孵育 30 分钟。取出
涂片,