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文献检索综述论文
双水相萃取别离技术的研究进展及应用
学院:化学与生物工程学院 专业:化学工程与工艺
学生:鸣昊 年级: 2012级
学号:201207547 程在常温常压下进展;
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(10)亲和双水相萃取技术可以提高分配系数和萃取的专一性。
由于双水相萃取具有上述优点,因此,被广泛用于生物化学、细胞生物学和生物化工等领域的产品别离和提取。
4 双水相萃取技术应用的影响因素
物质在双水相体系中的分配系数不是一个确定的量,它要受许多因素的影响(表2) 。对于某一物质,只要选择适宜的双水相体系,控制一定的条件,就可以得到适宜的(较大的)分配系数,从而到达别离纯化之目的,包括直接从细胞破碎匀浆液中萃取蛋白质而无须将细胞碎片别离,改变体系的pH值和电解质浓度可进展反萃取。
表2 影响生物物质分配的主要因素
聚合物及分子量的影响
不同聚合物的水相系统显示出不同的疏水性,水溶液中聚合物的疏水性按以下次序递增:葡萄糖硫酸盐< ***葡萄糖< 葡萄糖< 羟丙基葡聚糖< ***纤维素< 聚乙烯醇< 聚乙二醇< 聚丙三醇,这种疏水性的差异对目的产物与相的相互作用是重要的。同一聚合物的疏水性随分子量增加而增加,其大小的选择依赖于萃取过程的目的和方向,假设想在上相获得较高的蛋白质收率,对于PEG聚合物,应降低它的平均分子量,相反,假设想在下相获得较高的蛋白质收率,那么平均分子量应增加。
PH值的影响
体系的pH值对被萃取物的分配有很大影响,这是由于体系的pH值变化能明显的改变两相的电位差,如体系pH 值与蛋白质的等电点相差越大,那么蛋白质在两相中分配越不均匀。
温度的影响
分配系数对温度的变化不敏感,这是由于成相聚合物对蛋白质有稳定化作用,所以室温操作活性收率依然很高,而且室温时粘度较冷却时(4 ℃) 低,有助于相的别离并节省了能源开支。
5 双水相萃取技术的应用进展
在生命科学中的应用
传统的液液萃取别离,由于使用了有机溶剂,通常会使生物大分子〔如蛋白质等〕失活。而双水相技术作为一种生化别离技术,由于其条件温和,易操作,可调节因素多,目前已成功应用于生命科学中蛋白质、生物酶、细胞器、氨基酸、抗生素以及生物小分子等的别离纯化
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。双水相萃取技术在生命科学中的应用,国外的研究都取得了很多丰富的成果。如Miyuki[3]通过PEG/ K3PO4双水相体系,用两步法对葡糖淀粉酶进展了萃取纯化。用第一步萃取后含有酶的下相和PEG组成双水相作为第二步萃取体系,称作两步法。葡糖淀粉酶的最正确分配条件是PEG4000(第一步)、PEG1500 (第二步),pH=7,纯化系数提高了3倍。志娟等[3]用PEG/磷酸盐双水相体系萃取青霉TS67胞外活性蛋白,研究了PEG的浓度、磷酸盐的浓度对蛋白的分配特性的影响。周念波[4]等采用PEG-(NH4)2SO4双水相体系直接从Bacillus sp.LS发酵液上清液中别离壳聚糖酶,确定了室温下双水相萃取最正确条件为:PEG60020%、(NH4)2SO4 20%、NaCl %、,在此条件下壳聚糖酶分配系数达