文档介绍：第二章微生物检验的基本程序 anism examination procedures
采集样品
选择参考菌群
样品保存
样品处理
检验前准备
细菌总数
大肠菌群
致病菌
分离培养
增菌
分离培养
纯化
动物试验
血清学试验
染色镜检
其他试验
生化试验
报告
微生物检验一般程序图
一、检验前准备
Preparation for anism Examination
1. 准备好所需的各种仪器
2. 准备好所需的各种玻璃器皿
3. 准备好所需的各种试剂、药品、培养基
4. 无菌室灭菌
5. 检验人员的工作衣、帽、鞋、口罩等灭菌后备用
二、样品的采集
Sampling
在产品的检验中,样品的采集和处理是任何检验工作中最重要的组成部分。
关系到结果的准确性和检验机关决策的正确性。
采集的样品必须具有代表性,即所取的样品能够代表产品的所有成分。
科学的取样方案和正确的样品制备方法是必不可少的条件。
要了解产品加工的批号、原料的来源、加工方法、保藏条件、运输、销售中的各环节,以及销售人员的责任心和卫生知识水平等。
无论采取何种方案,都要实行随机抽样
1 微生物限度检验的特殊性 Particularity of the Microbial Limit Testing
(1)微生物限度检验对象的特性
不确定性
分布的不均匀性
活体特征
产品受外来微生物的污染,污染可有可无,可多可少;种类多样。依条件而定,非产品本身所固有。因此微生物限度检验对象是不确定的。污染是意外事件。污染批号中的不合格品是一个随机变量。
一个批号内的产品有的被污染,有的不被污染,分布不均匀;在被污染的部分中有的数量极多,有的较少,种类复杂或单一。这种不均匀性源于污染源的复杂性。
以活的微生物作为检验对象也是其独特特性,不同菌种的生长率和死亡率不尽相同,检测结果只代表取样时的状态。
2 抽样对微生物限度检测的影响
Effect of Sampling on Microbial Limit Testing
由于以上特殊性,抽样对微生物限度检测值将产生巨大的影响。当一批产品无污染时,抽样将不影响检验结果,当一批产品存在污染时,抽样的样本是随机变量,抽样的影响如下:
抽样方法:不同的方法对批产品总体的代表性是不同的,测定值也是有差异的。如可疑样本与随机样本。
抽样量:抽样量的多少对样本的代表性极为重要。
抽样次数:
3 样品的种类
Sample Type
样品可分为大样、中样和小样。
大样:一整批样品
中样:从样品各部分取得的混合样
小样(检样):分析用的样品。
抽样量:指从全批产品(或全过程) 抽取的单位包装。
检验量:是指检验用量,是抽样量各包装的混合样品的一部分。
检验量与抽样量是两种不同的范畴的量,抽样量大于检验量。
4 采样方法 Sampling Method
必须在无菌操作下进行
袋装、瓶装、罐装品,应采完整的未开封的样品
如果样品很大,用无菌采样器采集
固体样品:粉末状的边取边混,小块大包装品从不同部位的小块取样,大块整体样品从不同部位取样,兼顾表面和深度
半固体样品,用无菌勺从几个部位挖取
液体样品振摇混匀,用100mL无菌注射器抽取
冷冻品,保持冷冻状态
根据检验目的,确定取样方案
抽样:
供试品为随机抽样,一般抽样量为检验用量(2个以上最小包装单位)的3倍量。
对异常的供试品应针对性的抽样,对外观可疑污染或对有争议复验的样品应抽取可疑污染或对有争议复验的原样品。
从药品、瓶外观看出发霉、生虫及变质的药品不必再继续检验,直接判为不合格。
检样:
每次最少应分取二瓶(盒)以上的样品共10g或10ml。
中药蜜丸至少应分取4丸以上共10g。
(1)药品取样
Drug sampling