实验八土壤微生物分离和 纯化.ppt

文档介绍：实验八土壤微生物分离和 纯化
一、目的要求
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二、基本原理
从混杂的微生物群体中获得只含有某一种或某一株微生物的过程称为微生物的分离与纯化。
实验八土壤微生物分离和 纯化
一、目的要求
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二、基本原理
从混杂的微生物群体中获得只含有某一种或某一株微生物的过程称为微生物的分离与纯化。
要研究某种微生物的特性，首先须使该微生物处于纯培养状态，即培养物中所有细胞只是微生物的某一个种或株，它们有着共同的来源，是同一细胞的后代。自然界中各种微生物混杂生活在一起，即使取少量的样品也是许多微生物共存的群体。
土壤是微生物生活的大本营，它所含微生物无论是数量还是种类都是极其丰富的，因此土壤是发掘微生物资源的重要基地。
三、器材

牛肉膏蛋白胨培养基 马丁氏培养基 高氏1号培养基

盛99ml无菌水并带有玻璃珠的三角烧瓶

无菌玻璃涂棒 无菌吸管 无菌培养皿 土样
四、操作步骤

称取土样1克，放入盛99ml无菌水并带有玻璃珠的三角烧瓶中，振荡约10-20min，使土样与水充分混匀，，混合均匀，依此类推制成10-2、10-3、10-4、10-5不同稀释度的土壤溶液。

将三种培养基加热溶化，待冷至55~60℃时，马丁氏培养基中加入链霉素溶液（终浓度为30μg/ml），混均匀后分别倒平板，每种培养基倒4皿。
（一）平板划线法

左手拿皿底，右手拿接种环，挑取上述10-2的土壤悬液一环在平板上划线。
两种划线方法：
（1）不连续划线:先在平板培养基的一边作第一次平行划线3~4次，再转动培养皿，并将接种环上剩余物烧掉，待冷却后通过第一次划线部分作第二次平行划线，再用同样的方法通过第二次划线部分作第三次划线和通过第三次部分作第四次平行划线。
（三）培养
做好标记后，高氏I号和马丁氏培养基平板倒置于28℃温室中培养3~5d，牛肉膏蛋白胨平板置37 ℃温室中培养2~3d。

（四） 挑菌落
菌苔长出后，检查特征是否一致，用显微镜检查是否为单一微生物，若发现有杂菌，需要进一步分离、纯化，挑取单个菌落接种到斜面上。
（五） 计数
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