文档介绍:实验 1光学显微镜的使用及显微绘图
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一、目的要求
(1)熟悉显微镜的结构和各部件性能。
(2)掌握低倍镜/高倍镜的正确使用方法,掌 握油镜的使用方法。
(3)掌握显微绘图的基本方四、油镜的原理
油镜(油浸系物镜,通常有黑圈或Oil的标志),以香柏油或石蜡油为介质。这类油的折射率与玻璃的折射率大致相同。光线从被检物体直接射入物镜,其间因折射或反射而引起的光线损失很小,所以可以充分利用镜口角,显著提高物镜的分辨率。
油镜()m左右,这就是光学显微镜的分辨极限。
表1 几种物质的折射率
介质
空气
水
石蜡油
香柏油
加拿大树胶
光学玻璃
折射率(n)
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五、显微镜的使用方法
使用显微镜的要领就是从低倍物镜开始观察,先粗调后细调。 在低倍物镜下找到要观察的东西后,再逐步加大物镜倍数,仔细观察。
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低倍镜的使用
(1)检查:各部件有无损坏,如发现问题,立即报告教师请求处理。
(2)准备:将显微镜放于前方略偏左侧以便观察。打开电源开关,观察底座的光路中是否有光亮。慢慢调节同一旋钮,光线应逐步增强。转动粗调节钮,将载物台下降使物镜与载物台距离略拉开。再旋转物镜转换器,将低倍镜4 X对准载物台中央的通光孔(可听到“咔哒”声)。
(3)放标本片:标本片标签面向上,用标本夹夹好,把要观察的部分移到通光孔的正中央。
(4)调节焦距:边从目镜中观察,边调节粗聚焦旋钮,使载物台缓慢上升,直至视野中出现物像为止。如物像不太清晰,可转动细调节钮,使物像更加清晰。
(5)换10 X 物镜观察。此时,只须稍稍调节细调节旋钮即可。
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低倍镜的使用
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如果按上述操作步骤仍看不到物像时,可能由以下原因造成:
① 转动调节钮太快,超过焦点。应按上述步骤重新调节焦距。
② 物镜没有对正,应对正后再观察。
③ 标本没有放到视野内,应移动标本片寻找观察对象。
④ 光线太强,尤其观察比较透明的标本片或没有染色的标本时, 易出现这种现象,应将光线调暗一些后,再观察。
低倍镜的使用
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高倍镜的使用
如按上述操作仍看不到物像时,可能由下列原因造成:
①观察的部分不在视野内,应在低倍镜下寻找到后,移到视野中央,再换高倍镜观察。
②标本片放反了,应把标本片放正之后,再按上述步骤操作。
③焦距没调好,应仔细调节焦距。
如需要更换标本片时,应该先把载物台下降,然后把标本片移到载物台前方,再取下。
(1)依照低倍镜操作步骤,先用低倍镜找到清晰物像。
(2)将需要观察的部分移到视野的中央。
(3)眼睛从侧面注视物镜,用手移动转换器,换高倍镜40X。
(4)眼睛向目镜内观察,同时微微上下转动细调节钮,直至视野内看到清晰的物像为止。此时应把聚光器的孔径光阑适当调大,使之与物镜的镜口率相匹配。光源的强度也应调高。
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油镜的使用
应先调低倍镜、高倍镜找到要观察的物像,然后再用油镜观察,操作如下:
(1)先用低倍镜观察标本,然后更换高倍镜,把待观察的部分移到视野中央。
(2),再把油镜转到工作位置。
(3)在盖玻片上所要观察的位置滴一小滴香柏油。
(4)细心拧动粗调焦螺旋,使载物台慢慢上升。这时要仔细观察物镜前端与标本之间的距离,先使物镜前端与油滴接触,然后再慢慢使载物台上升,至物镜前端接近而没有碰到盖玻片为止。这步操作要特别小心,防止油镜压碎标本或损坏油镜()。
(5)眼睛要看目镜中,拧动细调焦螺旋,使载物台慢慢下降到能看清标本。这步操作要特别注意不要把细调焦螺旋的方向拧错,以防压碎标本。
(6)看清标本后,把聚光器下的孔径光阑开到它的口径与视场的直径恰好一样大,使聚光器的镜口率与物镜的镜口率相配合。如果聚光器的镜口率小于物镜的镜口率,则物镜的镜口率就不能充分发挥。
(7)观察完毕后,下降载物台,把油镜转离光轴,立即作清洁工作。先用干的擦镜纸擦一、二次,把大部分油去掉,再用二甲苯滴湿的擦镜纸擦两次,最后再用干擦镜纸擦一次。擦拭时要顺镜头的直径方向,不要沿镜头的圆周擦。擦拭要细心,动作要轻,不可用力擦。如果聚光器上有滴油也要同样清洁。载玻片上的油可用“拉纸法”擦净,即把一小张擦镜纸盖在载玻片油滴上,在纸上滴一些二甲苯,趁湿把纸往外拉,这样连续作3—4次,即可干净。
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