文档介绍：一种试剂盒的制作方法
一种试剂盒的制作方法
本发明属于医疗器械【技术领域】，本发明公开了一种试剂盒，该试剂盒包括以下组份：一抗***抗体、二抗鼠抗羊IgG、3H标记羊角拗苷甲、聚乙二醇6000、pH=（PBS缓冲液）、鼠抗羊IgG5X 10_7摩尔/升、3H标记羊角拗苷甲为10Ci/mmol、浓度为20%聚乙二醇6000水溶液、pH=(PBS缓冲液)、3H闪烁液、pH=***氨基甲烷缓冲液(Tris缓冲液)，含有或不含有羊角拗苷甲。
[0015](注:不含有羊角拗苷甲的试剂盒，可以按照标准曲线的绘制方法，制备标准曲线后，加入试剂盒说明书中，使用试剂盒人员可以按照标准曲线计算内源性洋地黄因子的浓度)。
[0016]所述一抗***抗体浓度为12μ g/mL，***抗体，溶于IOmL去离子水中，轻轻混合均匀，避免使用搅拌器。
[0017]所述为聚乙二醇6000水溶液，浓度20%，制备方法为取20mg PEG6000，置于IOOmL
去离子水中，用搅拌器充分搅拌，使固体溶解，充分混匀。
[0018]所述作为参照的非放射性羊角拗苷甲标准品浓度梯度分别为2nM，5nM，IOnM,20ηΜ，50ηΜ，及。
[0019]本发明所述的ηΜ为纳摩尔/升；本发明所述的M为摩尔/升。
[0020]本发明所述的试剂盒需要可以测量3H放射性的仪器设备进行测量。(设备名为scintillation counter。任何做放射性实验的实验室都有,操作过程为把样品放进去,运行操作软件，直接出结果。)
[0021]上述所述的试剂盒用于检测人体血清，胎盘组织分泌液，以及冷冻胎盘组织中的内源性洋地黄样因子的含量。
[0022]上述所述的试剂盒用于检测用于检测检孕期先兆子痫或子痫。
[0023]试剂盒用于检测孕期先兆子痫和子痫的方法为:
[0024](I)采集胎盘，切成2cmX 2cmX 2cm大小的组织块，液氮冷冻，保存于_80°C ；[0025](2)将冷冻胎盘组织块切成片，置于匀浆器中，放入液氮罐中冷冻I分钟；以1500rpm的速度将组织薄片匀浆5分钟；
[0026](3)收集匀浆组织，加入等量的甲醇，混匀，以2000rpm的速度离心5分钟，去除蛋白；收集离心上清液，真空浓缩，4°C保存；
[0027](4)取出试剂盒中***抗体、二抗、放射性标记羊角拗苷甲，分别等量加入，充分混合，室温孵育；
[0028](5)再加入等量的PEG6000溶液，离心，得到沉淀物；
[0029](6)，加入3H闪烁液；
[0030](7)测量样品放射量，根据标准曲线计算出样品中所含内源性洋地黄样因子浓度。
[0031]或者:取孕妇血样，获得血清，取出试剂盒中***抗体、二抗鼠抗羊IgG、3H标记羊角拗苷甲、pH=***氨基甲烷缓冲液(Tris缓冲液)，分别等量加入，充分混合，室温孵育；再加入等量的PEG6000溶液，离心，得到沉淀物；，加入3H闪烁液200 yL;测量样品放射量，根据标准曲线计算出样品中所含内源性洋地黄样因子浓度。
[0032]测得孕妇高于ΙΟηΜ，为先兆子痫。
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