文档介绍：一种筛选茵陈蒿汤药效物质基础的方法
一种筛选茵陈蒿汤药效物质基础的方法
一种筛选茵陈蒿汤药效物质基础的方法，它涉及一种筛选中药药效物质基础的方法。本发明要解决现有茵陈蒿汤筛选有效成分时间周期长、耗费大及成本高的问题。本发明方法：一、茵陈程中置于冰中保存，并且各组均肝门静脉 米血制备血液样品保存；
[0012] (2)样品分析：将尿液和血液样品均于4°C、8000rpm?12000rpm条件下离心 5min ?lOmin，取上清液，供 UPLC-Q-T0F/MS 分析；
[0013] 其中，高效液相色谱条件为：
[0014] 色谱柱填料 ACQUITY UPLC? BEH C18，规格为 50mmX 2. 1mm，1. 7 μ m ;柱温为 35°C ; 流动相为B相0. 1 %甲酸乙***和A相质量百分含量为0. 1 %甲酸溶液，流速为0. 40mL/min? 0· 60mL/min，检测波长 245nm，进样量 2. 0 μ L ;
[0015] 其中，质谱条件为：
[0016] 尿液样品：电喷雾离子源，采用正离子及Tof/MS模式检测；扫描参数：脱溶剂气流 量为500L/h?600L/h，温度为300°C，锥孔气流量为50L/h，离子源温度为110°C，毛细管电 压为2. 5KV，锥孔电压为35V，萃取电压为3. 0V，微通道板电压为1600V ;每0. Is采集一次； 采用亮氨酸-脑啡肽溶液为锁定质量溶液，质量扫描范围为m/zlOO?1000 ;
[0017] 血液样品：脱溶剂气流量为450L/h?650L/h，其余参数与尿液样品参数相同；
[0018] (3)CCL4诱导大鼠肝损伤模型生物标记物的确定：将各组生化指标的数值用 SPSS17. 0分析，确定相应数据组的生物标记物，在尿液代谢组中确定20个具有显著贡献 率的生物标记物，在血液代谢组中确定12个具有显著贡献率的生物标记物；其中尿液代谢 组中 20 个生物标记物为 C1QH2208、C14H180 5、C14H18N204、C 9H7N02、C16H31N0 2、C16H1205、C12H 16N203、 Ci2Hi8N2〇3>c16h31no5>c12h20n4o5>c24h34o2>c26h43no6>c10h7no3>c24h34o2>c24h36o3>c6h7n5o>c5h9no3>C24H3202、CnH2QN 203 和 C15H2203 ;血液代谢组中 12 个生物标记物为 C3H5N03、C16H18N 303、C8H1006、 〇2〇Η 36Ν602、c10h8o、c 26h37no3、c24h34o 2、c33h49no4、c8h 4o3、c12h13no2、c 24h36o3 和 c22h4(io4 ;
[0019] 三、PCMS研究方法的建立：
[0020] (1)血清中外源性中药化学成分信息数据的标准化：
[0021] 设有i个评价对象，j个评价指标，通过下述公式得到峰面积标准化yi;j，
[0022] yhJ = {x1J-xJ)lb],
[0023] 其中I为指标j的平均值，δ ^为指标j的标准差，为步骤一得到的茵陈蒿汤 大鼠血中移行成份的21个峰面积。
[0024] (2)代谢