酸枣仁合剂的薄层鉴别及酸枣仁皂苷a的含量测定.doc

文档介绍：酸枣仁合剂的薄层鉴别及酸枣仁皂昔A的含量测定
【摘要】目的：建立酸枣仁合剂的鉴别和含量测定方法。 方法：采用TLC法和HPLC法。结果：TLC法鉴别酸枣仁合剂中知母、 茯苓和川萼等药材；HPLC测定酸枣仁皂昔A的含量，酸枣仁皂昔A 。
1材料与仪器
LC 10A高效液相色谱仪（日本岛津公司），电子天平（B N型, 梅特勒 托利多仪器上海有限公司）。酸枣仁皂昔A对照品（734 9404）,知母、茯苓和川萼对照药材均购自中国药品生物制品检定所, 酸枣仁药材自购，经四川大学华西药学院王天志教授鉴定。酸枣仁合
剂为四川志远嘉宝药业有限责任公司制备，其余试剂均为分析纯。
2薄层鉴别
2. 1知母的薄层鉴别
取酸枣仁合剂样品20 mL,加乙醇40 mL,超声处理30 min后,
加入浓盐酸2 mL,超声处理30 min,过滤，滤液浓缩至约5 mL,加 水10 mL,用苯萃取2次，每次20 mL,分取苯层，用1%氢氧化钠溶 液10 niL洗涤1次后，水洗3次，每次10 mL,苯萃取液水浴挥干， 残渣加苯1 mL溶解即得。另取知母对照药材3 g,用水50 mL回流 提取lh,过滤，滤液照供试品溶液方法制备知母对照药材溶液。取 上述两种溶液各10 PL,分别点于同一含0. 4%CMC Na的硅胶G薄 层板上，以苯 丙酮（10 ：1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以 5%香草醛硫酸溶液，于室温、日光下检视，样品色谱中，在与对照药 材色谱相应位置上，显相同颜色的斑点，而阴性对照在相应位置无此 斑点。

取酸枣仁合剂样品20 mL,加乙酸乙酯30 mL,超声处理30 min, 取乙酸乙酯层，即得。另取茯苓对照药材2 g,加乙酸乙酯10 mL, 超声处理30 min,取乙酸乙酯层，即得茯苓对照药材溶液。取上述 两种溶液各10 pL,分别点于同一含0. 4%CMC Na的硅胶G薄层板 上，以环己烷乙酸乙酯（5 ： 1）为展开剂，展开，取出，晾干，置 紫外光灯（365 nm
）下观察，在与对照药材色谱相应位置上，显相同 颜色的荧光斑点，而阴性对照在相应位置无此斑点。
取酸枣仁合剂样品20 mL,加乙叫50 mL,超声处理30 min,取 乙叫层，减压浓缩至干，残渣加乙酸乙酯2 niL溶解即得。另取川萼 对照药材3 g,加水50 mL回流提取1 h,过滤，滤液同供试品溶液 制备方法处理即得川萼对照药材溶液。取上述两种溶液各10 mL,分 别点于同一含0. 4%CMC Na的硅胶G薄层板上，以环己烷 乙酸乙 酯冰醋酸(2 ： 1 ： 0. 1)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光 灯(365 nm)下观察，在与对照药材色谱相应位置上，显相同颜色的 荧光斑点，而阴性对照在相应位置无此斑点。
3酸枣仁皂昔A含量测定
3. 1色谱条件
采用 Hypersil C18 (4. 6 mm IDX 150 mm, 5 pm)色谱柱，以 乙腊 水(30 : 70)为流动相，检测波长为204 nm,流速0. 8mL/min, 柱温25 °Co理论塔板数按酸枣仁皂昔A计算，不低于5 000,酸枣
仁皂昔A与其相邻色谱峰的分离度均大于1. 5,见图1。
图1酸枣仁皂昔A液相色谱图
取酸枣仁合剂供试品10 mL,置于处理好［装大孔树