文档介绍:酸枣仁合剂的薄层鉴别及酸枣仁皂昔A的含量测定
【摘要】目的:建立酸枣仁合剂的鉴别和含量测定方法。 方法:采用TLC法和HPLC法。结果:TLC法鉴别酸枣仁合剂中知母、 茯苓和川萼等药材;HPLC测定酸枣仁皂昔A的含量,酸枣仁皂昔A 。
1材料与仪器
LC 10A高效液相色谱仪(日本岛津公司),电子天平(B N型, 梅特勒 托利多仪器上海有限公司)。酸枣仁皂昔A对照品(734 9404),知母、茯苓和川萼对照药材均购自中国药品生物制品检定所, 酸枣仁药材自购,经四川大学华西药学院王天志教授鉴定。酸枣仁合
剂为四川志远嘉宝药业有限责任公司制备,其余试剂均为分析纯。
2薄层鉴别
2. 1知母的薄层鉴别
取酸枣仁合剂样品20 mL,加乙醇40 mL,超声处理30 min后,
加入浓盐酸2 mL,超声处理30 min,过滤,滤液浓缩至约5 mL,加 水10 mL,用苯萃取2次,每次20 mL,分取苯层,用1%氢氧化钠溶 液10 niL洗涤1次后,水洗3次,每次10 mL,苯萃取液水浴挥干, 残渣加苯1 mL溶解即得。另取知母对照药材3 g,用水50 mL回流 提取lh,过滤,滤液照供试品溶液方法制备知母对照药材溶液。取 上述两种溶液各10 PL,分别点于同一含0. 4%CMC Na的硅胶G薄 层板上,以苯 丙酮(10 :1)为展开剂,展开,取出,晾干,喷以 5%香草醛硫酸溶液,于室温、日光下检视,样品色谱中,在与对照药 材色谱相应位置上,显相同颜色的斑点,而阴性对照在相应位置无此 斑点。
取酸枣仁合剂样品20 mL,加乙酸乙酯30 mL,超声处理30 min, 取乙酸乙酯层,即得。另取茯苓对照药材2 g,加乙酸乙酯10 mL, 超声处理30 min,取乙酸乙酯层,即得茯苓对照药材溶液。取上述 两种溶液各10 pL,分别点于同一含0. 4%CMC Na的硅胶G薄层板 上,以环己烷乙酸乙酯(5 : 1)为展开剂,展开,取出,晾干,置 紫外光灯(365 nm
)下观察,在与对照药材色谱相应位置上,显相同 颜色的荧光斑点,而阴性对照在相应位置无此斑点。
取酸枣仁合剂样品20 mL,加乙叫50 mL,超声处理30 min,取 乙叫层,减压浓缩至干,残渣加乙酸乙酯2 niL溶解即得。另取川萼 对照药材3 g,加水50 mL回流提取1 h,过滤,滤液同供试品溶液 制备方法处理即得川萼对照药材溶液。取上述两种溶液各10 mL,分 别点于同一含0. 4%CMC Na的硅胶G薄层板上,以环己烷 乙酸乙 酯冰醋酸(2 : 1 : 0. 1)为展开剂,展开,取出,晾干,置紫外光 灯(365 nm)下观察,在与对照药材色谱相应位置上,显相同颜色的 荧光斑点,而阴性对照在相应位置无此斑点。
3酸枣仁皂昔A含量测定
3. 1色谱条件
采用 Hypersil C18 (4. 6 mm IDX 150 mm, 5 pm)色谱柱,以 乙腊 水(30 : 70)为流动相,检测波长为204 nm,流速0. 8mL/min, 柱温25 °Co理论塔板数按酸枣仁皂昔A计算,不低于5 000,酸枣
仁皂昔A与其相邻色谱峰的分离度均大于1. 5,见图1。
图1酸枣仁皂昔A液相色谱图
取酸枣仁合剂供试品10 mL,置于处理好[装大孔树