文档介绍：一种检测羊肚菌菌丝的胶体金免疫试纸条的制作方法
一种检测羊肚菌菌丝的胶体金免疫试纸条的制作方法
一种检测羊肚菌菌丝的胶体金免疫试纸条，涉及一种生产食用菌检测的改进，其特征是：在塑料衬板上依次贴附有样品垫、金标垫、***纤维素膜、吸水纸，将样后10 min观察结果，；C线显色，T线不显色，
结果为阴性；若C线不显色，则试纸条无效。
[0010]本发明的有益效果是:具有检测周期短(I小时内出结果)；操作简便，不需要专业人员及仪器设备检测；成本低(每个检样花费需要几元至十几元);定性检测结果准确。本方法可解决羊肚菌人工栽培中菌种是否是羊肚菌菌种，以及栽培后培养料中生长的菌丝是否是羊肚菌菌丝的监测，可以减少损失。
【专利附图】
【附图说明】
[0011]图1是本发明结构图。
【具体实施方式】
[0012]下面结合附图对本发明作进一步描述:
实施例1
如图所示，I是VC底板P、2是样品垫、3是胶体金垫、4是NC膜、5是吸水滤纸、6是质控线、7是检测线。
[0013]羊肚囷囷种，编号:51589，购于中国农业微生物囷种保减中心；
鼠源抗羊肚菌单克隆抗体(C6A8杂交瘤细胞株)、/兔源抗羊肚菌多克隆抗体，及由长春理工大学生命科学技术学院生物工程系实验室制备，抗羊肚菌单抗杂交瘤细胞株现保存于该实验室；
胶体金溶液，上海金标生物科技有限公司；
金标垫、样品垫、吸水纸、***纤维(NC)膜，上海金标生物科技有限公司；
牛血清白蛋白(BSA)，sigma公司分装；
HRP标记山羊抗鼠IgG (H+L)，HRP标记山羊抗兔IgG (H+L)购于北京中杉金桥生物技术有限责任公司； pH试纸，上海华美公司；
实验所需的主要仪器、设备=Mill1-Q超纯水系统制备，磁力搅拌器，恒温培养箱，冷冻离心机，酶标仪，等。
[0014]I 方法

(1)%碳酸钾溶液: g碳酸钾+超纯水100 ml配制成溶液；
(2)PBS缓冲液( mol/L磷酸盐缓冲液):准确称取***化钠8 g，*** g， g， g，加蒸馏水定容至1000 ml;
(3)包被抗原稀释液； mol/L PBS ;
(4)重悬液(含1%BSA的PB液): mol/ ,混合后加入BSA至终浓度为1%。
所用玻璃器皿先用清洁剂清洗干净，然后用盐酸洗液浸泡24 h，再用蒸馏水浸泡24h、最后蒸馏水、双蒸水洗3?4次，烘干后备用[1]。

用硫酸铵沉淀法[2]分别纯化抗羊肚菌的单克隆抗体C6A8、以及多克隆抗体。纯化后的抗体分别用ELISA方法测定其效价，将抗体稀释20、40、80......5120倍分别加入1_9孔，
1Ul孔SP2/0作为阴性对照。考马斯亮蓝法测其蛋白浓度。

/L的盐酸将胶体金溶液调至不同的梯度，取pH为7、
8、、9、10的胶体金溶液各10ul， mg/mL