文档介绍：多糖的检测方法
关于多糖含量测定，业内有两种评价方法。
一种是狭义上严格的多糖测定，即水提取多糖后，以凝胶色谱柱分离、洗脱提纯粗多糖得到较单一分子量的多糖，再水解成各种单糖，以HPLC法分离测定各单糖，即可得到比较严格意义上的多糖含量及SO4・5H2O,，加水溶解并稀释至1L，混匀，备用。
（4）铜试剂溶液：取铜试剂储备液50mL，加水50mL，。临用新配。
（5）洗涤剂：取水50mL，加入10mL铜试剂溶液、10mL氢氧化钠溶液，混匀。
（6）硫酸溶液（10%）：取100mL浓硫酸加入到800mL左右水中，混匀，冷却后稀释至1L。
（7）苯酚溶液（50g/L）：，加水溶解并稀释至100mL，混匀。溶液置冰箱中可保存1个月。
（8）葡聚糖标准储备液：，加水溶解，并定容至50mL，混匀，置冰箱中保存。。
（9）葡聚糖标准使用液：，置于100mL容量瓶中，加水至刻度，混匀，置冰箱中保存。。
4、测定步骤
（1）样品处理：
a、沉淀粗多糖：，置于50mL离心管中，加入无水乙醇20mL，混匀5min后，以3000r/min离心5min，弃去上清液，反复操作3~4次。，混匀后，供沉淀葡聚糖。
b、沉淀葡聚糖：准确吸取b项终溶液2mL置于20mL离心管中，加入100g/，沸水浴中煮沸2min，冷却，以3000r/min离心5min，弃去上清液。残渣用洗涤液数毫升洗涤，离心后弃去上清液，反复操作3次，残渣用10%（体积分数），加水稀释至刻度，混匀。此溶液为样品测定液。
（2）标准曲线的绘制：准确吸取葡聚糖标准使用液0、、、、、、（相当于葡聚糖0、、、、、、）分别置于25mL比色管中，，加入50g/，在旋转混匀器上混匀，，于旋转混匀器上小心混匀，置沸水浴中煮沸2min，冷却后用分光光度计在485nm波长处以试剂空白溶液为参比，1cm比色皿测定吸光度值。以葡聚糖浓度为横坐标，吸光度值为纵坐标，绘制标准曲线。
（3）样品测定：，加入50g/，在旋转混匀器上混匀，，置沸水浴中煮沸2min，冷却至室温，用分光光度计在485nm波长处，以试剂空白为参比，1cm比色皿测定吸光度值。从标准曲线上查出葡聚糖含量，计算样品中粗多糖含量。同时做样品空白
实验。
5、结果计算
X=[（m1-m2）xV1xV3xV5]/[m3xV2xV4xV6]
式中
X—样品中粗多糖含量（以葡聚糖计）（mg/g）；ml—样品测定液中葡聚糖的质量（mg）；m2—样品空白液中葡聚糖质量（mg）；m3—样