文档介绍:2
薄层层析和柱层析
浅谈薄层层析和柱层析
作者:张璐璐
【摘要】柱层析和薄层层相是有机试验中常用的分别和分析手段,本文参考了一些专述,简要地阐述了薄层层析和柱层析的具体操作方法。 【关键词】薄层2
薄层层析和柱层析
浅谈薄层层析和柱层析
作者:张璐璐
【摘要】柱层析和薄层层相是有机试验中常用的分别和分析手段,本文参考了一些专述,简要地阐述了薄层层析和柱层析的具体操作方法。 【关键词】薄层层析 柱层析
色谱法自十九世纪末二十世纪初制造以来,慢慢进展成为一类最常用的分别技术,其原理是利用不同结构或不同性质的物质在固定性和流淌相中的分布不同而进行分别,当流淌相流过固定相时,物质被流淌相带动以不同的速度向前移动,经过一段时间之后,不同物质移动的距离有较明显的差异,因而实现分别。几十年来,色谱法的进展特别快速,高效液相色谱,气象色谱等仪器相继研制成功,使物质的分别能够高效快速的完成。但是,在试验室中,有时需要处理大量的样品,或跟踪分别或反应进行的状况,因此,常规的柱层析及薄层层析仍是试验室常用的分别检测方法。 1 薄层层析
薄层层析是将吸附剂均匀地铺在玻璃板上,把欲分别的样品到薄层上,然后用合适的开放剂开放,从达到分别鉴定的目的。 吸附剂的选择
氧化铝、硅胶、硅藻土、聚酰胺、纤维素、淀粉、蔗糖等均可用于薄层层析,其中氧化铝、硅胶由于它们的吸附性能好,适用于各类化合物的分别,所以应用最广泛。氧化铝一般是微碱性的吸附剂,适用于碱性物质和中性物质的分别,特别是对于生物碱的分别应用最多;而硅胶是微带酸性的吸附剂,适用于酸性物质及中性物质的分别。在考虑选择吸附剂时,可以先接受硅胶或氧化铝,不适用时再试用别种吸附剂。 薄层层析操作方法
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将被检测的样品用合适的溶剂溶解,用管口平整的毛细管取样品液,轻轻接触到距离薄层下端1厘米处点板。一块薄层上如需点几个样品时,-1厘米,而且需点在同一水平线上。点样后,让溶剂挥发,放入层析缸中开放。
开放剂主要使用低沸点的有机溶剂,所选用的开放系统主要依据样品的极性及溶解度来选择。样品必需易溶于开放剂,这样样品才有可能随开放剂在薄层板上爬升而开放,-。若选用的开放剂极性过大时,可增大低极性组分的比例,可换用更小极性的溶剂,反之亦然。
开放剂到薄层板3/4高度左右即可取出,放置于空气中自然干燥或用电吹风吹干。在紫外灯下观看,若看不到斑点,再放入碘缸中显色。用碘也不能显色的物质可尝试将显色剂直接喷洒于新开放的硬板上显色。 2 柱层析
柱层析是试验室中分别大量物质行之有效的方法。下面就以最常用的硅胶吸附层析为例,阐述一下层析操作的具体步骤。氧化铝层析的操作上与硅胶相同。
层析用硅胶
层析用硅胶一般选用市售的硅胶H,硅胶H中不含石膏及其它有机粘合剂。但是由于颗粒太细,层析时常常需要加压,操作起来比较繁琐。若只需粗分或要分别的物质 Rf值相差较大,选用100-160目或200-300目硅胶