文档介绍：第一页，共三十页。
微生物
原核类:
真核类
非细胞类：
细菌、蓝藻等
酵母菌、霉菌、食用菌等
真菌：
原生生物：
草履虫、变形虫等
病毒
是一切肉眼看不见或看不清楚的微小生物的总称．牛肉膏
蛋白胨
NaCl
琼脂
水
重量
5g
10g
5g
20g
定溶至1000mL
三、实验操作
思考：该培养基从物理性质分属于哪种？原因？含有几种基本营养成分？牛肉膏提供上述哪几种成分？
准确称取各种成分，注意事项：牛肉膏要放在称量纸上称量，牛肉膏、蛋白胨都易吸潮，称取时动作要迅速，称后及时盖上瓶盖。
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：
：
：待培养基冷却到50OC左右时，在酒精 火焰附近倒平板。
注意：溶化后应该调节PH（在灭菌前）
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?
思考3
①溶化时为什么要将牛肉膏连同称量纸一起加热?
②加琼脂的目的是什么?
可保证粘附在称量纸上的牛肉膏也能
溶于水中,减少误差
作为凝固剂
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思考4
①在灭菌前, 用牛皮纸、旧报纸包紧盛有培养基的锥形瓶的目的是什么？
?
在灭菌时能避免水蒸汽凝结时浸湿棉塞；
在取出培养基锥形瓶时也能起到隔绝空气中杂菌污染的作用
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倒平板:
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1).培养基灭菌后，需要冷却到50 ℃左右时，才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度？
问题讨论
答：可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶，感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时，就可以进行倒平板了。
2).为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？
答：通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基。
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3).平板冷凝后，为什么要将平板倒置？
4).在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能用来培养微生物吗？为什么？
答：平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的湿度也比较高，将平板倒置，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。
答：空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生，因此最好不要用这个平板培养微生物。
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四、纯化大肠杆菌
微生物接种方法常见的有平板划线法和稀释涂布平板法。
（1）.平板划线法
通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。
在数次划线后可以分离到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体称菌落。
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将接种环放在火焰上灼烧，直到接种环_______
在_______旁冷却接种环，并打开棉塞
将试管口通过火焰
.将已______的接种环伸入菌液中蘸取一环菌液
左手将皿盖打开一条缝隙，右手将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划__________条平行线，盖上皿盖。注意不要划破培养基。
.将试管通过火焰，并塞上棉塞
火焰
冷却
三至五
灼烧接种环，待其冷却后，从第一区域划线的_______开始往第二区域内划线。重复以上操作，在三、四、五区域内划线。注意不要将最后一区的划线与第一区相连。
末端
烧红
将平板_____放入培养箱中培养。
倒置
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思考：1、为什么在操作的第一步要灼烧接种环？
操作的第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物；
思考：2、每次划线之前都要灼烧接种环？
每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后，接种环上残留的菌种，使下一次划线时，接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端，从而通过划线次数的增加，使每次划线时菌种的数目逐渐减少，以便得到菌落。
思考：3、在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环吗？
划线结束后灼烧接种环，能及时杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者。
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思考：3、在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行划线？
避免接种环温度太高，杀死菌种
思考：4、在作第二次以及其后的划线操作时，为什么总是从上一次划线的末端开始划线？
划线后，线条末端细菌的数目比线条起始处要少，每次从上一次划线的末端开始，能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少，最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落。
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平板划线法的要点
接种前，每次划线前及接种后都要灼烧接种环
接种环灼烧后等其冷却后再进行划线
第二次