文档介绍：1 高效液相色谱法测定乳宁丸中芍药苷含量【关键词】乳宁丸芍药苷色谱法高压液相乳宁丸是由赤芍、浙贝母、当归等 12 味中药材细粉及中药材提取物制成的丸剂。具有舒肝活血, 软坚散结之功效, 用于治疗乳房胀痛有块, 月经不调或量少, 色紫成块及乳腺增生。为了控制乳宁丸的质量, 保证临床用药效果, 本实验以芍药苷为指标, 采用高效液相色谱法测定其含量, 结果较为满意。 1 实验材料 Aglient 1100 高效液相色谱仪, G1314A 紫外线测器, 77251 手动进样器, 浙大 N2000 色谱数据工作站; 芍药苷化学对照品(由中国药品生物制品检定所提供,批号:110736 拟 200321 规格:供含量测定) ;乙***为色谱纯;其他试剂均为分析纯。 2 方法与结果 2 色谱条件色谱柱: ReliaSil 拟 C18( mm × 250 mm,5 μ m); 流动相: 乙***— % 磷酸(13 : 87) ; 流速: mL/min; 检测波长: 233 nm; 柱温:室温。 对照品溶液的制备精密称取芍药苷对照品 mg ,置 5 mL 量瓶中,加甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀,精密吸取 1 mL, 置5 mL 量瓶中,加甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀,即得(每1 mL 含 mg 芍药苷)。 供试品溶液的制备取本品 2g, 精密称定, 置具塞锥形瓶中, 精密加入甲醇 100 mL, 称定重量, 放置 2h, 超声处理 1h ,冷却至室温,用甲醇补足减失的重量,滤过,取续滤液 20 mL , 置于 100 mL 溶量瓶中, 用甲醇定容, 摇匀, 微孔滤膜( μ m) 滤过,取续滤液,即得。 阴性对照品溶液的制备取缺赤芍的样品 g,照供试品溶液的制备项下同法操作,即得。 线性关系考察精密吸取芍药苷对照品溶液( mg/mL)2 、4、6、8、 10μL 分别注入液相色谱仪, 依法测定, 根据对照品的峰面积积分值对芍药苷的进样量绘制标准曲 3 线, 得回归方程: Y= × 104X + × 103 , r= 。结果表明:芍药苷在 ~ μg 之间呈良好的线性关系。 方法学考察 精密度试验分别吸取 5μL 的对照品溶液,重复进样 5 次,测得其峰面积 RSD 为 % 。 稳定性试验精密吸取对照品溶液 5μ L,于0、2、 4、 24、 36h 分别依法测定,结果峰面积 RSD 为 % ,芍药苷在 30h 内结果稳定。 重现性实验精密称取同一批样品 5 份,按供试品溶液的制备和测试方法测定,结果峰面积 RSD 为 % 。 回收率试验精密称取已知样品含量( mg/g) 的样品 5 份,分别加入芍药苷对照品一定量,按正文 项下操作,测定并根据样品含量及芍药苷对照品加入量, 计算回收率。结果平均回收率为 % , RSD 为 %(n=5) 。 2