文档介绍：食品化学实验指导书
焦云鹏 赵海雯 许旖旎 编
量也越差。
试剂和资料
1） 锥形瓶（ 250ml）。
2） 量筒（ 50ml）。
3） 碱式滴定管（ 250ml ）。
4） 花生油或许菜油。
5）
操作步骤
1） 正确称取 1~3g 菜油于 250ml 锥形瓶中。
2） 在瓶内加入乙醇－乙醚混淆液50ml，充分振荡，使油脂样品完整溶解成透明溶液。
待油样完整溶解后，加入 1％酚酞指示剂 1～ 2 滴，立刻用 ％ KOH标准溶液滴定至溶液成
微红色（搁置 30S 内不退色）为终点，并记录取去的 KOH的体积，并按下式进行计算。
酸价
耗费 KOH
的毫升数
KOH
标准溶液的浓度
KOH 分子量
油脂样品的克数
思虑题
1） 测定油脂酸价时，装油的锥形瓶和油样中均不得混有无机酸，这是为何？
2） 掌握纸层析对混淆氨基酸进行分别和判定的技术。
实验四 氨基酸的纸上层析
一、实验目的和要求：
学习纸层析法的基来源理。
掌握纸层析法对混淆氨基酸进行分别和判定的技术。
二、实验原理：
纸层析法属于分派层析法的一种，是以滤纸作为惰性支持物。滤纸纤维上散布大批的
亲水性羟基，所以能吸附水作为固定相，往常把有机溶剂作为流动相。将样品在滤纸上 ( 此
点称为原点 ) ，用有机溶剂进行展层时，样品中的各种溶质即在两相溶剂中不停进行分派。
因为各种溶质在两相溶剂中的分派系数不一样， 因此不一样溶质随流动相挪动的速率不等， 于是
从点样的一端向另一端睁开时， 样品中不一样溶质被分别开来， 形成距原点距离不等的层析点。样品被分别后在纸层析图谱上的地点，是用比移值 Rf 来表示的
原点到层析斑点的中心 距离
Rf
原点到溶剂前沿的距离
在必定条件下 ( 如温度、展层剂的构成、层析纸质量等不变
) ，某物质的
Rf 值是一个常
数，借此可作定性剖析依照。本实验只利用纸层析分别氨基酸。
三、试剂和器械：
层析缸 ( 可用标本缸取代 ) 。
层析滤纸 ( 新华一号滤纸 ) 。
喷雾器、电吹风、三角板、铅笔、毛细管( 可用微量注射器取代 ) 。
氨基酸标准溶液： 1%的甘氨酸、赖氨酸、色氨酸、组氨酸、缬氨酸、脯氨酸。
混淆氨基酸溶液：将 1%的甘氨酸、赖氨酸、色氨酸、组氨酸、缬氨酸、脯氨酸也按 1%浓度制成混淆溶液。
展层剂甲：正丁醇： 80%甲酸：水＝ 15： 3：2 ( 体积分数 )
展层剂乙：正丁醇： 12%氨水： 95%乙醇＝ 13： 3：3 ( 体积分数 )
(7) 色剂： %茚三酮－丙酮溶液 ( 取 茚三酮溶于 100mL无水丙酮， 贮于棕色瓶
中待用。 )
四、操作步骤：
取滤纸二张 (12cm ×12cm)，按图要求画好平行线和样点并在样点上标号。
点样 用毛细管挨次点上氨基酸标准样液和混淆液于样点并记录各种点所点的氨
基酸。点样时必定要注意：第一，样点直径控制在 3mm之内；第二，每样点需重复点 3 次，但每次需经干燥后方可再点， 为了迅速干燥， 可用电吹风在较低档温度下风干。 点好样的滤纸卷成筒状，用透明胶纸黏接，要注意在卷纸筒时，两纸不可以搭接。
展层 在层析缸内放好展层剂甲， ( 展层剂液面高度约 1cm)，将一张点好
样的滤纸当心地移入层析缸， 点样端浸入展层剂甲中， 要特别注意不要使样点浸入展层
剂。盖好层析缸。当看到展层剂抵达画定的溶剂前沿线时，拿出滤纸， 用较低档温度电吹风
吹干。同时将另一张点好样的纸照上法放入层析，此纸只此一次单向层析。
将吹干的滤纸转 90°，再卷筒状，用透明胶固定，放入另一个搁置有展层剂乙的层析缸内展层。展层完成吹干。此纸则为双向层析。
显色 将上述单向层析和双向层析的滤纸经吹干后用喷雾器把茚三酮溶液平均地
喷在纸上 ( 不要喷的太多 ) ，取下纸，放入 65℃烘箱中显色数分钟，或用电