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文档介绍

文档介绍:实验二植物染色体组型分析
一、实验目的
学****并掌握根尖处理、染色、压片及制片观察的方法。
观察有丝分裂各时期染色体的形态变化,了解有丝分裂全过程。
观察分析植物细胞有丝分裂中期染色体的长短、臂比和随体等形态特征;学****染色体组型分析的离完毕后,将根尖置于清水中漂洗4-5次,每次1-2分钟,最后一次漂洗时长为5分钟。漂洗目的是将盐酸从根尖中置换出来,以免与后续制片染色的过程造成影响。
4、制压、镜检
切取根尖分生组织放在清洁的载玻片,剥取分生组织,滴加1-2滴苯酚品红染液,染色
8〜12min后加上盖玻片,覆以吸水纸压片,45%醋酸分色,中性树胶封片。镜检。
(二)核型分析
1、显微照相、冲洗和放大
选取5个前期末(或者中期)的细胞进行显微照相。要求染色体分散良好,没有重叠,数目完整,随体和着丝点明显,没有断裂,着色鲜明,形态清晰,且各条染色体处于同一平面上。选定的符合要求的细胞在10X40倍下进行显微照相(可用10X100倍的油镜),然后冲洗,选取图像清晰的底片,放大、洗印出染色体形态清晰的照片。在显微照相的同时,对镜台测微尺进行同样倍数拍摄,放大,然后根据照片上的实际长度,计算放大倍数。
2、测量:依次测量放大照片各染色体长臂和短臂的长度(随体是否计入臂长须注明)。根据测量、记录染色体形态测量数据计算:
绝对长度(“m)=放大的染色体长度三放大倍数
染色体组总长度=该细胞单倍体全部染色体长度(包括性染色体)之和
相对长度(%)=每个染色体长度三染色体组总长度X100
臂比=长臂长度三短臂长度
着丝粒指数=短臂三该染色体长度X100
3、配对:根据测量数据,即染色体相对长度、臂率、着丝粒指数、次缢痕的有无及位置、随体的形状和大小等进行同源染色体的剪贴配对。
4、排列:
⑴染色体对从大到小依次排列;等长染色体对,短臂长的在前;具随体染色体、性染色体可单独排在最后。
⑵异源的染色体要分别排列(如小麦的A、B、D染色体组)
5、剪贴:把上述已经排列的同源染色体按先后顺序粘贴在绘图纸上。粘贴时,短臂向上、长臂向下,各染色体的着丝粒排在一条直线上。所得组型图。
6、分类:臂比是反应着丝点在染色体上的位置。根据此可确定染色体所属的形态类型。染色体形态类型:臂比(长臂/短臂)形态类型。
1〜;〜;〜;>;SAT随体染色体。
7、将结果整理汇入表格填表
8、综合描述
⑴计数体细胞染色体数目:统计细胞数三30,85%具有恒定一致的数目;
⑵以分裂中期、高质量的体细胞染色体图像作为形态描述,以5个以上的细胞染色体,测其平均值。
⑶核不对称系数(Ask)=长臂总长三全组染色体总长X100%
⑷染色体的长短:按Kuo等的方法,以染色体相对长度系数()组成划分染色体的长短,(L);(M2);(M1);<(S)。2n=24=8L+2M2+10M]+4S。
相对长度系数()=每条染色体的相对长度三染色体的平均相对长度
⑸染色体组型分类:Stebbi