可溶性蛋白含量测定法.doc

文档介绍：可溶性蛋白含量测定法(考马斯亮蓝染色法)
可溶性蛋白含量测定法(考马斯亮蓝染色法)
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可溶性蛋白含量测定法(考马斯亮蓝染色法)
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可溶性蛋白含量测定（考马斯亮蓝染色法）
试剂配制
1）考马斯亮蓝可溶性蛋白含量测定法(考马斯亮蓝染色法)
可溶性蛋白含量测定法(考马斯亮蓝染色法)
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可溶性蛋白含量测定法(考马斯亮蓝染色法)
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可溶性蛋白含量测定（考马斯亮蓝染色法）
试剂配制
1）考马斯亮蓝溶液配制：称取100mg考马斯亮蓝，溶于50ml90%乙醇中，加入100ml85%
W/V）磷酸，再用蒸馏水定容到1L。在留宿后过滤并贮于棕色瓶中，常温下可保留一个
月。
90%乙醇配制：95%乙醇和75%乙醇按3:1体积比混淆配制，即95%，75%乙醇
。
（2）100g/ml牛血清蛋白（BSA）标准溶液：称取10mgBSA定容至100ml即为100g/ml。
或称取25mgBSA加蒸馏水水溶解后定容至100ml，再从中吸取40ml蒸馏水定容至100ml。
（3），：
A母液，：取Na2HPO412H2O()，用蒸馏水
定容至500ml。
B母液，：取NaH2PO42H2O()，用蒸馏水
定容到50ml。
：，，用蒸馏水定容至1000ml。

取6支具塞试管，按下表加入试剂，摇匀，向各管中加入
5ml考马斯亮蓝试剂，5min
左右，以0号试管为空白比较，在
595nm下比色测定吸光度，以蛋白质含量为横坐标，
以吸光度为纵坐标绘制标准曲线。
试剂
0号
1号
2号
3号
4号
5号
标准蛋白体积/ml






蒸馏水体积/ml






蛋白质含量/g
0
20
40
6