文档介绍:1 食用菌食用菌相关资料平菇孢子简易分离法笔者将多孢子分离与组织分离有机结台,使退化品种的优良特性得以恢复。现简要介绍如下,以供同行参考。 1 制备培养基马铃薯 200g ,葡萄糖 20g ,磷酸二氢钾 3g ,硫酸镁 , VB1 微量,琼脂 18g ,水 1000mL , pH 值自然。按常规方法制试管斜面。 2 选择种菇选取生长健壮,八成熟,无病虫害的平菇一朵,用锋利小刀在其上切取菇形美观的菇肉组织一片待用。 3 收集孢于及培养纯化在无菌条件下,拨出斜面试管口的棉塞,用试管口从菇种菌褶处顶穿菇种片, 使一小片菇种陷入管口以内, 迅速塞好棉塞。于 24- 26℃条件下恒温培养 6 小时后取出。在酒精灯火焰附近去掉棉塞, 用消毒小钩钩出管内的小片菇种, 将棉塞连同试管口在火焰上灼烧后,迅速塞上棉塞,于 24~ 26 ℃恒温培养 1周, 待孢子萌发, 井长成成片菌丝后, 切取生 2 长迅速、无杂菌污染的菌丝团转管。待菌丝长满管后备用。 4 组织分离将孢子分离所得试管菌种,按常规方法接入棉子壳培养基的原种瓶中(750mL) ,待菌丝长满瓶后自然出菇。选取菇体健壮、菇形正常,无病虫害的菇体组织分离后得纯菌种,经栽培出菇试验后便可用于生产. 食用菌母种污染的纯化食用菌母种是食用菌产品高产的关键,食用菌前两级菌种必须纯培养,如果污染了杂菌可试用以下方法。细菌污染提纯法 1、材料含量为 4 万单位/mL 的庆大霉素 1支; 经高压灭菌的 PDA 斜面培养基 10支( 试管规格 18mm × 180mm) ,无菌 1mL 注射器 1 支; 6 号针头 1 个。 2、方法在无菌箱内,把4 万单位/mL 的庆大霉素用无菌注射器分别注入 1O 支冷却至 45℃左右的斜面试管培养基中, 摇动培养基使之充分混匀, 立即摆斜面。然后把被细菌污染的菌种以无菌操作方法移人该斜面培养基中,置 25℃下培养。两次可把细菌甩掉, 效果甚佳, 对食用菌菌丝无抑制作用。霉菌污染提纯法 1、试管棉塞受湖污染了霉茼大都出现在斜面前端,可在酒精灯火焰连同培养基一起灼烧,使局部受热烤死霉菌。试 3 管后半部用湿纱布包裹,然后转管。 2、斜面中间出现霉茸用一块比霉菌稍大的滤纸,滴上甲醛或酒精, 用无菌镊轻轻益在霉菌菌落上, 可抑制霉菌生长, 待食用菌菌丝伸展稍长, 立刻转管, 即得纯化菌丝。也可从污染较远的一端挑起少量菌丝,移植到新的斜面培养基前端,当菌丝萌发向外蔓延时,及时将种块连同培养基挖出。连续处理 2~3 次,可得纯化菌丝。此法也可用于处理放线菌的污染。 3 、斜面出现霉茼严重时也可到药店购买制霉菌素片剂。把药片放在无菌水中片刻去掉糖衣后放入盛有 10m L 的小三角瓶中, 操作方法同“细菌污染提纯法”第2点。两次可把霉菌甩掉。草菇菌种的提纯复壮初探菌种的分离与筛选是在食用菌栽培过程中的重中之重。食用菌的菌种在使用过程中存在着变异与退化, 尤其是草菇菌丝, 生长快退化也快, 因此要定期引种或提纯复壮, 才能保证菌种质量及种性稳定,从而为最终产量稳定打下基础。 1 组织分离工厂化生产草菇时,为了保证种性稳定,大多采用定期组织分离、严格筛选, 获得菌种。一般每次选择种菇时, 首先要选择出菇好(产量高,整体菇形大小适中,整齐度高)的 4 菇房, 菇房内无明显病虫害; 其次在此菇房内选择出菇最好的床架, 从该床架中挑选出菇最好的料层; 在该料层上最好的一片菇中选择无杂菌虫害、生长健壮、非常结实、底盘肥大的草菇幼菇( 五六分熟, 呈小水蜜桃状)3~4个。采下幼菇立即放入无菌或洁净的塑料袋中, 连同分离用的试管培养基带到菌种室超净工作台。组织分离时,先用 75% 的消毒酒精消毒双手和工具以及种菇表面(操作熟练者也可不消毒种菇表面) ,用充分灼烧的手术刀先在纵面上浅浅的环切一道(不要切破外菌幕) ,在种菇的基部从正中切开一个小口,用手捏种菇外部剥开菇蕾, 在菇盖与菇柄交界处用灭过菌冷却后的手术刀浅切一个“田”字形, 每个小块 3~ 4mm 见方( 尽量不要划穿菇肉触及菌褶), 直接用刀将菌肉小块接入试管培养基上, 塞上棉塞。将菌肉小块拍到试管底部, 置于 29~ 31℃环境培养。分离到的试管要达到 24 支左右,如因操作失误而达不到此数量, 要补充合格种菇再分离。 2 分离菌株的鉴定与筛选 初筛 1①一般分离培养 3d 左右菇肉上萌发出白色菌丝, 此时挑出因操作不过关而导致斜面感染杂菌的试管,余下继续培养; ②待菌丝长至 2cm 左右时,观察菌丝生长情况: a 基内菌丝整齐浓密, 纤细有力呈银灰色, 生长速度快; 气生菌丝爬 5 壁能力强,长势整齐一致的继续培养; b. 基内菌丝很稀疏, 气生菌丝长势混乱, 气生菌丝发白, 气生菌丝远比基内苗丝多或者感染杂菌,只要