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动物细胞培养
（1） 概念：动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织，将它分散 成单个细胞，然后放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和繁殖。
（2） 动物细胞培养的流程：取动物组织块（动物胚
动物细胞培养
（1） 概念：动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织，将它分散 成单个细胞，然后放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和繁殖。
（2） 动物细胞培养的流程：取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官 或组织）一剪碎一用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞一制成细胞 悬液一转入培养瓶中进行原代培养一贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原 蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养。
（3） 细胞贴壁和接触抑制：悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称 为细胞贴壁。细胞数目不断增多，当贴壁细胞分裂生长到表面相互抑制时， 细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。
（4） 动物细胞培养需要满足以下条件
无菌、无毒的环境：培养液应进行无菌处理。通常还要在培养液中添 加一定量的抗生素，以防培养过程中的污染。此外，应定期更换培养液，防 止代谢产物积累对细胞自身造成危害。
营养：合成培养基成分：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元 素等。通常需加入血清、血浆等天然成分。
温度：适宜温度：°C+°C； pH： 〜。
气体环境：95%空气+5%CO2。O2是细胞代谢所必需的，CO2的主要作用是
维持培养液的pH。 2 2 2
（5） 动物细胞培养技术的应用：制备病毒疫苗、制备单克隆抗体、检测 有毒物质、培养医学研究的各种细胞。
动物体细胞核移植技术和克隆动物
（1） 哺乳动物核移植可以分为胚胎细胞核移植（比较容易）和体细胞 核移植（比较难）。
（2） 选用去核卵（母）细胞的原因：卵（母）细胞比较大，容易操作；卵 （母）细胞细胞质多，营养丰富。
（3） 体细胞核移植的大致过程是：高产奶牛（提供体细胞）进行细胞 培养；同时采集卵母细胞，在体外培养到减二分裂中期的卵母细胞，去核
（显微操作）（注：为什么要用卵细胞？它可以提供充足的营养；操作简 便；细胞质不会抑制细胞核全能性的表达）；将供体细胞注入去核卵母细 胞；通过电刺激使两细胞融合，供体核进入受体卵母细胞，构建重组胚胎； 将胚胎移入受体（代孕）母牛体内；生出与供体奶牛遗传基因相同的犊牛。
（4） 体细胞核移植技术的应用：①加速家畜遗传改良进程，促进良畜 群繁育；②保护濒危物种，增大存活数量；
③生产珍贵的医用蛋白；④作为异种移植的供体；⑤用于组织器官的 移植等。
（5） 体细胞核移植技术存在的问题：克隆动物存在着健康问题、表现 出遗传和生理缺陷等。
动物细胞融合
（1） 动物细胞融合也称细胞杂交，是指两个或多个动物细胞结合形成 一个细胞的过程。融合后形成的具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核 细胞，称为杂交细胞。
（2） 动物细胞融合与植物原生质体融合的原理基本相同，诱导动物细 胞融合的方法与植物原生质体融合的方法类似，常用的诱导因素有聚乙二 醇、灭活的病毒、电刺激等。
（3） 动物细胞融