pcr基因扩增仪 （pcr gene amplifier）.ppt

文档介绍：第八章 PCR基因扩增仪  (PCR Gene Amplifier)
内容提要
1. PCR基因扩增仪的工作原理
PCR技术的原理及发展
PCR基因扩增仪的工作原理
2. PCR扩增仪的分类与结构
定性PCR扩增仪
实时荧光定量PCR扩增仪
3. PCR扩增仪的性能指标、操作规程及常见故障的排除
PCR扩增仪的性能指标
PCR扩增仪的操作规程
PCR扩增仪常见故障的排除
4. PCR扩增仪的应用
内容提要
3. PCR扩增仪的性能指标、操作规程及常见故障的排除
PCR扩增仪的性能指标
PCR扩增仪的操作规程
PCR扩增仪常见故障的排除
4. PCR扩增仪的应用
第一节 PCR基因扩增仪的工作原理
一、PCR技术的发展及原理
1971年,Kleppe等人首次在文章中准确、客观地阐述了PCR方法。
1985年,美国PE-Cetus公司的Kary Mullis等人发明PCR技术。
第一节 PCR基因扩增仪的工作原理
PCR技术的本质是体外核酸扩增,加热使双链DNA解开螺旋,在退火温度条件下引物同模板DNA杂交,在Taq DNA聚合酶,dNTPs,Mg2+和合适pH缓冲液存在条件下延伸引物,重复“变性→退火→引物延伸”过程至25-40个循环,呈指数级扩大待测样本中的核酸拷贝数。
第一节 PCR基因扩增仪的工作原理
PCR的基本原理
第一节 PCR基因扩增仪的工作原理
二、PCR基因扩增仪的工作原理
从PCR反应基本原理可以看出,PCR基因扩增仪工作关键是温度控制。
第一节 PCR基因扩增仪的工作原理
PCR仪温度控制
水浴锅控温
压缩机控温
半导体控温
离心式空气加热控温
第二节 PCR扩增仪的分类与结构
PCR扩增仪的种类
普通PCR扩增仪
实时荧光定量
PCR扩增仪
梯度PCR仪
原位PCR仪
第二节 PCR扩增仪的分类与结构
荧光实时定量PCR(real-time quantitative PCR,RQ-PCR)技术在PCR反应体系中加入特异性的荧光染料或探针,荧光信号的变化真实地反映了体系中模板的增加,通过检测荧光信号,从而实时监测整个PCR反应过程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析。