文档介绍：心肌梗死的动物模型制作的论文
【关键词】心肌梗死模型动物
心肌梗死是严重危害人类健康的心血管疾病,也是主要致死因素之一。在心血管疾病研究中,动物模型被广泛用于发病机制和药物治疗研究。研究目的不同则所需的动物模型平台亦不同,心肌梗死动物模型的有效建立是完成相关实验的前提,对研究急、慢性心肌梗死的病理演变过程、诊断及治疗均有重要意义。
目前国内外常见的建立心肌梗死动物模型的方法主要有两大类:⑴采用各种方法直接造成冠状动脉狭窄或堵塞,其试验周期短,可以观察梗死后再灌注对心肌细胞的损伤。⑵诱发冠状动脉粥样硬化形成狭窄与梗死,其试验周期长,死亡率较高。
通过开胸结扎不同部位冠状动脉建立急性心肌梗死模型已沿用多年[1~5],结扎大鼠冠状动脉是医学实验中已得到公认、最常用的心肌梗死模型。国外多采用jons法[6]即在自主呼吸下,开胸迅速挤出心脏,结扎冠状动脉。结扎时固定部位于左心耳下缘与肺动脉圆锥间,以左冠状静脉主干为标志,连同一小束心肌一同结扎,于左心耳根部下方2mm处进针,在肺动脉圆锥旁出针,~,过浅缝线易于脱落、血管结扎不完全,过深易致传导阻滞。由于大鼠冠状动脉发育变异较大,血管常显示不清,此时可固定部位盲扎,亦可达到结扎目的。观察近心尖的左室前壁,是否失去原有光泽,而显暗灰色或青紫色;收缩力是否降低或消失。.观察心电图是否逐渐出现st 段弓背向上抬高及q波等,心电图变化才能说明冠脉结扎情况,只有看到上述肯定结果,才可关闭胸腔,否则需重新结扎冠脉。此法结扎冠状动脉后心电图及病理表现相似,多为广泛前壁心肌梗死,稳定性较好。
在开胸状态下直接用缝合线结扎冠状动脉分支,造成该支配区域的永久性缺血。此法动物创伤大、死亡率高,要求术者技术娴熟,动作快,难度大。大鼠右肺四叶,左肺一叶,呈海绵状,有时左肺将心脏大部分覆盖,因此在开胸时最易伤及充气的肺组织。因而宜在短时间内调小潮气量,结扎冠脉时需拉开肺组织,稍有不慎,手术器械或拉钩就可能损伤肺。因大鼠无纵隔结构,开胸后造成开放型气胸;还需注意气管插管时避免暴力损伤气道,以免形成气管瘘,注射654-2控制分泌物等。这些都是影响模型建立是否成功和术后存活率的主要因素之一。
有人在此基础上进行改进,即在开胸状态下用缝合线环套冠状动脉分支,拉紧闭环可造成冠状动脉分支支配区域的缺血,闭环松开后,血管再通[7]。这种拉线法心肌缺血再灌注模型简单易行,可以对缺血时间进行精确的控制,从而量化心肌缺血负荷的大小。
为避免了麻醉引起的死亡现象,每一只动物均严格称重,精确计算***量。对衰弱和过胖动物,将单位体重所需剂量适当调小。由于在麻醉期间动物的体温调节机能受到限制,出现体温下降,会影响实验结果的准确性,应给麻醉动物采取保温措施[8],一般使用40eroid缩窄器建立了渐进性心肌缺血模型。ameroid缩窄器是一种不锈钢环,内衬具有亲水性的酪蛋白衍生物,可以吸水缓慢向内膨胀,在两三周后逐渐压迫置入环内的靶血管,乃至闭塞。该模型对冠状动脉分支的阻断是一个慢性过程,模拟了脂质在冠状动脉壁沉积,造成动脉管腔狭窄并最终闭塞的病理过程[20]。一般多用的ameroid法基本操作如下[21~25]:取左侧第3,4肋间切口进路,必要时可断开肋骨;采用小切口进胸后剪开心包暴露心脏;游离lad或lc