文档介绍：细菌基因组 DNA 提取方法
1、，12000rpm离心5min，弃上清；
2、加入600ul 1xTE重悬菌体沉淀，4°C 12000rpm离心5min，弃上清；
3、加入450ul 1xTE和5细菌基因组 DNA 提取方法
1、，12000rpm离心5min，弃上清；
2、加入600ul 1xTE重悬菌体沉淀，4°C 12000rpm离心5min，弃上清；
3、加入450ul 1xTE和50ul 10mg/mL溶菌酶和10ul 100mg/mL蜗牛酶，吹吸混匀，37C 孵育1h （或4C过夜），每隔15min颠倒混匀一次；
4、加入600ul TENS裂解液，和与沉淀等体积的玻璃珠，吹吸混匀，涡旋震荡10min 后，再加入30ul 20mg/mL蛋白酶K,吹吸混匀，55C孵育1h，每隔15min颠倒混匀一次；
5、 4C 12000rpm离心10min,；
6、加入等体积的酚：***仿：异戊醇（25:24:1），充分混匀，-20C静置2min，4C 12000rpm 离心5min；
7、，加入等体积的***仿：异戊醇（24:1），充分混匀，-20C静置 2min，4C 12000rpm 离心 5min；
8、，加入1/10体积的3M醋酸钠，2倍体积（加入醋酸钠后的终体积）预冷的无水乙醇，充分混匀，-20C沉淀2h。（- 积的异丙醇，-20C沉淀2h）， 4C 12000rpm离心10min，弃上清；
注：如需得到纯度更高的样品，可先用异丙醇沉淀，无菌水充分溶解后，离心取上清，再用醋酸钠+无水乙醇沉淀一次。
9、加入600ul预冷的70%乙醇洗涤DNA沉淀，颠倒混匀，4C 12000rpm离心5min，弃上清；重复洗涤一次。
10、吸干离心管中的残留液体，待离心管风干后， RNase A,吹吸混匀，取3ul电泳检测，剩余置于-20C保存。
附：
一、所需仪器
恒温水浴锅、高压灭菌锅、高速冷冻离心机、超净工作台、通风橱、电子天平、称量纸、药匙、各种规格移液器及吸头、剪刀、、2mL离心管、15mL离心管、50mL离心管、涡旋震荡仪、掌上离心机、4C及-20C冰箱、微波炉、电泳仪、凝胶成像仪、Nanodrop微量分光光度计、烧杯、三角瓶、量筒、玻璃棒、封口膜、橡皮筋。
二、所需试剂
75%酒精、Tris、浓盐酸、EDTA、溶菌酶、蜗牛酶、蛋白酶K、NaCl、SDS （十二烷基磺酸钠）、 Tri ton XT00、NaAc （醋酸钠）、冰乙酸、无水乙醇、无菌水（或超纯水）、Tris饱和酚、 ***仿（三***甲烷）、异戊醇、异丙醇、玻璃珠（直径1-2mm）、琼脂糖凝胶、RNaseA
10XTE （pH ）
100 mM Tris-Cl，pH
10 mM EDTA，pH
高压灭菌，室温保存，使用时超纯水稀释至1X浓度。
1M Tris-HCl（pH ）
160 mL H^）， Tris碱，加入浓