文档介绍：关于毛细管电泳和毛细管电色谱
第1页，讲稿共38张，创作于星期二
毛细管电泳（capillary electrophoresis;CE）是一类以高压直流电场为驱动力，毛细管为分离通道，依据样品中各组分之间淌度和分配行为的差异而实样方式一般是将毛细管的一端从缓冲液移出，放入试样瓶中，使毛细管直接与样品接触，然后由重力、电场力或其他动力来驱动样品流入管中。进样量可以通过控制驱动力的大小或时间长短来控制。CE进样技术均适用于CEC。
目前有三种方法可以让样品直接进入毛细管：
电动法、压力法和浓差扩散法。
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. 电源及其回路
电流回路系统包括高压电源、电极、电极槽、导线和电解质缓冲溶液等。CE和CEC一般采用0 ~ ±30 kV连续可调的直流高压电源。理想的电源应具备：
(一端接地)；
、电流、功率输出模式任意可选；
、电流或电功率的梯度；
%。
~l mm的铂丝制成。
电极槽，即缓冲液瓶，通常是带螺口的小玻璃瓶或塑料瓶(1~5mL不等)，要便于密封。缓冲液内含电解质，充于电极槽和毛细管中，通过电极、导线与电源连通，一同构成整个电流回路。
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. 毛细管及其温度控制
熔融石英毛细管在CE中应用最广泛，熔融石英拉制得到的毛细管很脆，易折断，一般在外表面涂有聚酰亚***保护层，使之变得富有弹性，不易折断。
内径越小，表面积/体积比越大，散热效果越好。内径小，样品负载小，检测、进样、清洗等操作困难。
一般使用的毛细管柱内径在25 ~100 μm之间，目前最常用的是50μm和75μm两种。
检测窗口部位的外涂层剥离。
焦耳热效应产生径向温度梯度，还会导致分离重现性差。商品仪器大多有温度控制系统，主要采用风冷和液冷两种方式。
一般采用物理吸附或化学键合两种方式形成毛细管内壁涂层，对石英毛细管进行改性或修饰，可有效控制电渗流、抑制吸附进而优化分离。
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. 检测系统
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. 检测系统
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. 毛细管电泳分离模式及应用
. 毛细管区带电泳（capillary zone electrophoresis; CZE）
. 基本操作条件
毛细管区带电泳也称为毛细管自由溶液区带电泳，是毛细管电泳最基本、也是应用最广的一种操作模式。其分离原理是基于样品组分荷质比的差异。
需要控制的操作变量主要是电压、缓冲液浓度、pH值和添加剂等。
缓冲液的选择通常须遵循下述要求：
1．在所选择的pH范围内有合适的缓冲容量。
2．本底检测响应低。
3．自身的淌度低，即离子大而荷电小。
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. 毛细管区带电泳（CZE）
在CZE分离中，除了背景电解质外，常常还在缓冲溶液中加入某些添加剂：
2. 表面活性剂
3. 手性添加剂
对于许多水难溶的样品，如果在缓冲液中加入少量的有机溶剂，常常能有效改善分离度。在极端情况下，可完全使用有机溶剂，或以有机溶剂为主体，这就是非水毛细管电泳技术。
图21-6 电渗流反向示意图
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. 毛细管区带电泳（CZE）
. 应用
毛细管区带电泳特别适合分离带电化合物，包括无机阴离子、无机阳离子、有机酸、***类化合物、氨基酸、蛋白质等，不能分离中性化合物。
毛细管区带电泳3分钟内分离30种阴离子电泳图
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. 胶束电动毛细管色谱（MEKC）
MEKC是在电泳缓冲溶液中加入表面活性剂，当溶液中表面活性剂浓度超过临界胶束浓度时，表面活性剂分子之间的疏水基团聚集在一起形成胶束，成为分离体系的准固定相，溶质基于在水相和胶束相之间的分配系数不同而得到分离。
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. 胶束电动毛细管色谱（MEKC）
MEKC是在电泳缓冲溶液中加入表面活性剂，当溶液中表面活性剂浓度超过临界胶束浓度时，表面活性剂分子之间的疏水基团聚集在一起