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月季花药培养.ppt

上传人:禹辰 2022/7/22 文件大小:2.71 MB

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月季花药培养.ppt

文档介绍

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月季花药培养
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花丝
花药:囊状结构,内有很多花粉
花粉是由花粉母导成功率的重要因素,一般来说,在单核期,细胞核由中央移向细胞一侧的时期,花药培养成功率最高,
为了挑选到单核期的花药,通常选择完全未开放的花蕾,
2、培养基的组成
月季花的培养基配方
在1000mlMS培养基配方中添加
2,4—D
KT
IAA 4mg

二、实验操作
一 材料的选择
选择花药时,一般要通过镜检来确定其中的花粉是否处于适宜的发育期,
最常用的方法有醋酸洋红法,但是,某些植物的花粉细胞核不易着色,需采用焙花青-铬矾法,这种方法能将花粉细胞核染成蓝黑色,
二 材料的消毒
1、花蕾用70%的酒精浸泡30秒
2、无菌水清洗
3、无菌吸水纸吸干花蕾表面的水分
4、%的***化***溶液中2~4分钟 也可质量分数为1%的次***酸钙溶液或饱和漂白粉溶液
5、无菌水冲洗3~5次
用于培养花药,实际上多数未熟,由于它的外面有花萼、花瓣保护,通常处于无菌状态,所以只要将整个花蕾或幼穗消毒即可,
为什么花瓣松动会给材料的消毒带来困难
答:花瓣松动后,微生物就可能侵入到花药,给材料的消毒带来困难,
为什么花瓣松动会给材料的消毒带来困难
讨论:
三 接种和培养
灭菌后花蕾,要在无菌条件下除去萼片和花瓣,并立即将花药接种到培养基上,在剥离花药时,要尽量不损伤花药 否则接种后,容易从受伤部位产生二倍体的愈伤组织 ,同时还要彻底去除花丝,因为与花丝相连的花药不利于愈伤组织或胚状体的形成,
通常每瓶接种花药7-10个,温度控制在25℃左右,不需要光照,幼小植株形成后才需要光照,
一般经过20-30天培养后,会发现花药开裂,长出愈伤组织或释放出胚状体,将愈伤组织及时转移到分化培养基上,以便进一步分化出再生植株,
如果花药开裂释放出胚状体,则一个花药内就会产生大量幼小植株,必须在花药开裂后尽快将幼小植株分开,分别移植到新的培养基上,否则这些植株将很难分开,
在花药培养中,特别是通过愈伤组织形成的花粉植株,常常会出现染色体倍性的变化, 主要原因是营养核和生殖核融合造成的, 故需对培养出来的植株作进一步的鉴定和筛选,
植物组织培养技术与花药培养技术的比较
项目
相同点
不同点
植物组织培养技术
离体的植物组织经脱分化形成愈伤组织,再分化成丛芽,诱导出根,然后进行移栽,
外植体为体细胞,染色体数无需加倍,
花药培养技术
取材为花药,培养的为单倍体幼苗,植株弱小,高度不育,必须用秋水仙素处理,使染色体加倍,恢复正常植株的染色体数,而且为纯种,
课题成果评价
选材是否恰当
选材是否成功是花药培养成功的关键,应学会通过显微镜观察处于适宜发育期的花粉,
课题成果评价
无菌技术是否过关
如果出现了污染现象,说明某些操作步骤,如培养基灭菌、花蕾消毒或接种等有问题,
课题成果评价
接种是否成功
如果接种的花药长出愈伤组织或释放出胚状体,花药培养的第一步就成功了,要适时转换培养基,以便愈伤组织或胚状体进一步分化成再生植株,
练****1
F2代紫色甜玉米的基因型组成可能为Aasusu或AAsusu,如果运用常规育种方法,将F2代中的紫色甜玉米与白色甜玉米 aasusu 进行测交,可以选择出基因型为AAsusu纯种紫色甜玉米,但这种方法比较繁琐,耗时也较长,需要至少三年的选种和育种时间,
如果利用花药培养的技术,在F1代产生的花粉中就可能有Asu的组合,再将花粉植株进行染色体加倍,就可以直接得到紫色甜玉米的纯合子 AAsusu ,这种方法可以大大缩短育种周期,
练****2
植物组织培养技术与花药培养技术的 相同之处是:培养基配制方法、无菌技术及接种操作等基本相同,
不同之处在于:花药培养的选材非常重要,需事先摸索时期适宜的花蕾;花药裂开后释放出的愈伤组织或胚状体也要及时更换培养基;花药培养对培养基配方的要求更为严格,这些都使花药培养的难度大为增加,
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工业
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