文档介绍：实验八微生物的分离纯化及平板计数
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一、目的要求
实验原理
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本实验采用平板分离法:
1)选择合适的选择培养基。
2)通过稀释倒平板和平板划线等技术得到单
个菌落。
,取一定量的稀释液接种在平板上,经过培养,平板上出现单个菌落,即为一个菌落形成单位(colony-forming units,cfu) 。
吸取稀释液 取一吸管,以无菌操作法分别吸取10-5、10-6、 10-,加在已制好的平板培养基上。
涂板 用玻璃刮刀将稀释液在培养基上充分混匀铺平,倒置于恒温箱培养。
计算出每克土壤中细菌的数量。 即用某一培养皿内的菌落数乘以该培养皿接种液的稀释倍数即得。
挑取单个菌落,进行划线分离。
微生物的分离—平板涂布法
微生物的分离—平板倾注法
吸取稀释液 取一吸管,以无菌操作法分别吸取10-4、10-5 、 10--1mL,加在空培养皿中。
混和摇匀 水平轻轻转动培养皿,使菌液、培养基充分混匀铺平,放在平坦的桌面上,凝固后倒置于恒温培养箱培养。
计算出每克土壤中放线菌的数量。
挑取单个菌落,进行划线分离。
微生物的分离—平板划线法
制成平板。
凝固后,用接种环取相应的菌液一环(10-1)在平板上划线。 :将挑取有样品的接种环在平板培养基表面作连续划线。完毕后,倒置于28~300C温室培养。 :用接种环以无菌操作挑取土壤稀释液1环,先在培养基的一边作第一次平行划线3—4条,再转动培养皿约60度角,并将接种环上剩余物烧掉,待冷却后通过第一次划线部分作第二次划线会,同法依次作第三次和第四次划线。划线完毕,盖上皿盖,倒置于温室培养。
挑取单个菌落接种于斜面培养基上,如果不纯,再移植纯化,最后得到纯培养。