文档介绍：大肠杆菌紫外线诱变及抗药性菌株筛选
0740063阿磨兰
.前言
抗生素能破坏细菌细胞壁的结构， 使细菌的繁殖和生长受到抑制。但某些细菌对抗生素
表现出抗性，原因是其基因发生了改变， 产生能抵抗抗生素的性状。在自然情况下，细菌的
.1ml
做普通培养基的涂布培养，每个处理两个重复；同时每个照射剂量取
射液直接做两个筛选培养基的涂布培养。
⑤ 对照涂布培养：将照射的菌液稀释1000倍，在稀释?^ 养基涂布培养，2个筛选培养基的涂布培养。涂布要均匀，培养基表面无液流。
⑥37c培养24h后，计数，统计分析。对于筛选的抗性菌种进行验证、纯化。
.4,结果计数、分析、统计及讨论
①以辐射时间为横坐标，以存活菌落数的 lg值为纵坐标，作紫外线对大肠杆菌致死效应曲 线。
②列公式计算不同辐射剂量下的致死率。
100%
一照射前活菌数/ml-照射后活菌数/ml 一 照射前活菌数/ml
③计算并比较不同辐射剂量下大肠管杆菌的抗药突变率， 并分析不同辐射剂量的诱变效果差
异原因
突变率=筛选平板菌数/普通平板菌数*100%
④抗药性菌株的筛选与纯化
将一抗性克隆划线到一新的抗性平板上，与对照菌相比较，观察生长状况
.结果与分析
实验结果记录及初步整理
精品文档交流
照射时间
筛选培养基活菌数
普通培亦卜 稀释度
普通培养基中菌数
溶液浓度
个/ml
1号
个/皿
2号 平均
1号
个/皿
2号
平均
0
0
0
0
100
5000
5600
5300
*10 7
0
0
0
10-2
2000
1820
1820
*106
10
0
0
0
10-3
366
251
251
6
*10
0
0
0
10-2
25
64
*104
20
0
0
0
10-3
2
0
1
4 1*10
0
0
0
10-2
2
5
3
*10 3
40
0
0
0
10-3
0
0
0
0
0
0
0
10-2
5
0
3
*10
80
0
0
0
10-3
40
0
20
2*10 5
0
0
0
10-2
0
0
0
0
160
0
0
0
10-3
0
0
0
0
最佳照射时间的设置
结合数据处理结果的图和表分析，在 10s的照射下，细菌死亡率达到了 95%, 20s时达到了
%,说明在20s内大部分菌株已经死亡，而整个实验过程中未发生任何正突变，可能与 此有较大关系。已经有实验证实，当菌种死亡率达到 70%~80%时，突变率最大。所以在做
进一步的实验中应该减少照射剂量， 或通过增多10s内的照射设置，或增大照射距离，因为
时间太短可能导致控制实验的难度加大。使死亡率变化曲线能突显出变化趋势。
该实验中的筛选培养基
但这抗性也是有一定范
50mg/L,实验证明该
筛选培养基是将发生突变的菌株从普通菌株中显现出来