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细胞免疫学实验.ppt

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细胞免疫学实验.ppt

文档介绍

文档介绍:细胞免疫学实验20140606
_I Can Dream About 
内容提要
淋巴细胞转化实验
2
E花环实验
1
大吞噬实验
3
小吞噬实验
4
细胞免疫学实验20140606
_I Can Dream About 
内容提要
淋巴细胞转化实验
2
E花环实验
1
大吞噬实验
3
小吞噬实验
4
淋巴细胞转化试验
★植物血凝素(PHA)、刀豆蛋白A(ConA)选择性刺激T细胞增殖;
★脂多糖(LPS)、葡萄球菌A蛋白(SPA)可刺激B细胞增殖;
T细胞、B细胞表面具有抗原识别受体和有丝分裂原受体
美洲商陆
淋巴细胞转化试验
原理
当T淋巴细胞在体外培养时,加入PHA或ConA刺激, T淋巴细胞可转化为淋巴母细胞,同时伴有DNA、RNA及蛋白质合成的增加,最终导致细胞分裂。根据其转化率可测定T淋巴细胞的功能,从而反映机体的细胞免疫功能。
DNA合成
分化
淋巴母细胞
刺激物
细胞变大
细胞浆扩大
空泡
核仁明显
核染色质疏松
T淋巴细胞
未转化细胞
过渡态细胞
淋巴母细胞
转化淋巴细胞的判断标准
细胞类别
形态特征
转化的淋巴细胞
未转化的淋巴细胞
淋巴母细胞
过渡型细胞
胞体大小(直径)
10~20µm或更大
12~16µm
6~8µm
胞 核
位 置
多偏于一侧,少数位于中央
中央或稍偏
多位于中央
染 色 质
疏松,呈粒状
较疏松
致密团聚
核 仁
清晰,可见1~3个
有或无

有丝分裂
有时可见


胞 浆

丰富,核之一侧较宽广
稍宽
较少,常呈一窄环
嗜碱性
++++
+++~++
++~+
空 泡
常可见
有或无

伪 足
常可见
有或无

内容提要
大吞噬实验
3
淋巴细胞转化实验
2
E花环实验
1
小吞噬实验
4
原理
巨噬细胞对颗粒性抗原有强大的吞噬能力。常用细胞型抗原如鸡红细胞、白色念珠菌、酵母细胞等与巨噬细胞孵育,检测巨噬细胞的吞噬能力。
原理
*
大吞噬试验
鸡红细胞
大吞噬细胞
对鸡红细胞消化程度分级:
Ⅰ级:未消化,鸡红细胞核清晰,着色正常。
Ⅱ级:轻度消化,鸡红细胞核模糊,核肿胀,着色淡。
Ⅲ级:完全消化,鸡红细胞核溶解,染色极淡。
结果计算
可观察鸡红细胞的消化程度,以判断巨噬细胞胞内杀伤功能。
吞噬百分比=吞噬鸡红细胞的巨噬细胞数/所计数的巨噬细胞总数(吞噬的+未吞噬的)×100%
吞噬指数=100个巨噬细胞吞噬的鸡红细胞总数/100个巨噬细胞
临床意义
参考值:正常人吞噬百分比为60%~65%,吞噬指数1%左右
临床意义:可作为机体抗肿瘤能力的判断指标。恶性肿瘤病人吞噬百分比为34%~38%。%左右。有人报告,食道癌、胃癌、肠癌、乳腺癌以及其它恶性肿瘤患者的吞噬百分比都在45%以下,吞噬指数也降低。不少患者在术后有不同程度的回升,提示本试验也可作为判断肿瘤疗效及预后的一个参考指标。
内容提要
3
2
1
4
E花环实验
淋巴细胞转化实验
大吞噬实验
小吞噬实验
原理
血液中的中性粒细胞通称小吞噬细胞。有强大的吞噬和消化异物的功能,构成机体天然抵抗力。在机体固有免疫和适应性免疫中发挥重要的作用。对中性粒细胞的检测包括运动功能、吞噬功能和杀伤功能的测定。对于感染等疾病有重要的辅助诊断意义。