文档介绍：附录：常用试剂配制及应用
一、常用缓冲液、试剂的配制
碳酸盐缓冲液（Carbonate-BicarbonateBuffer）
由于碳酸盐pH值偏碱，因此，常用于pH>9的缓冲液配制（附表1）
碳酸盐缓冲液（A液：
(I)NaCl80g
KCl4g
MgSO- 7HO1g
MgC2 - 6HO1g
用双蒸储水定容至450ml。
(II)CaCl (或 CaCb - )
用双蒸储水定容至50ml。
将I和II液混合，即成A液。
贮存液B液：
NaHPO・ ,
,
,
葡萄糖，
酚红应先置研钵内磨细，然后按配方顺序一一溶解，用双蒸储水定容至 500ml 0
(3)应用液：A、 C湿热灭菌20min,取A和B液各25ml, 加无菌双蒸储水至450ml,使用前用无菌的％或%NaHCO至所需pH
注意：药品必须全部用试剂，并按配方顺序加入，用适量双蒸水溶解，待前 一种药品完全溶解后再加入后一种药品，最后补足水到总量。
无 CsT、 Mg+Hank' s 液(Hank' sSolutionwithoutcalcium,magnesiumsulfate ) NaCl80g,
KCl4g,
NaHPO・ ,
,
葡萄糖10g,
用双蒸储水溶解后，加入％酚红溶液50ml,再加入双蒸水至1000ml, C 湿热灭菌20min, 4c冰箱保存。临用前将原液用无菌双蒸水作 1: 10倍稀释，
用无菌的%l£%NaHCO!至所需pK
柠檬酸盐缓冲液(CitrateBuffer)
磷酸氢钠
葡萄糖
蒸储水加至100ml。
枸檬酸-磷酸盐缓冲液(Citricacid-PhosphateBuffer)
Lcitrateacid , LNaHPQ 等量混合，调节 pH至。
LEDTA,
EDTA g
NaOH20 g
将EDTA 2HO加入800ml水中，在磁力搅拌器上剧烈搅拌。用NaOHM节pH 至，EDTAft到接近才完全溶解，定容至1L。分装后高压蒸汽灭菌。
%酚红溶液
取酚红置于研钵中逐滴加入1mol/LNaOH容液，边研磨边使酚红转变为钠盐
溶于水中，加双蒸水至100ml,过滤后，4c冰箱保存。
醋酸钾(PotassiumAcetate )
在60ml5mol/L醋酸钾溶液中，加入冰醋酸和水。该溶液用于碱性裂解。
3mol/L 醋酸钠(SodiumAcetate),和
，用冰乙酸调pH至或用稀释乙酸调pH至，
加双蒸水至1L。分装后高压灭菌。
柠檬酸钠缓冲液(SodiumCitrateBuffer)
HCl(1mol)4ml
无水乙醇95ml
先用100ml去离子水溶解柠檬酸钠，然后加入HCl和无水乙醇，再补充去离子水
至总量200ml。
饱合硫酸俊溶液(SaturatedAmmoniumSulfateSolution)
取500ml双蒸储水，加入约400克硫酸俊，水浴加热至70C,磁力搅拌器充分 搅拌，直到加入的硫酸钱不再溶解，以氨水(也可用 NaOH调，室温保存。
二、酶免疫检测常用试剂配制
包被液(CoatingBuffer)(碳酸盐缓冲液)
NaCO •
溶于双蒸水至1000ml。
封闭液(Confiningliquid) (5%兑脂乳-PBS溶液，)
脱脂乳50g
加磷酸盐缓冲液(PBS至1000ml溶解。
洗液(washingliquid)
***
磷酸氢二钠(12HQ
吐温
加去离子水至1000ml溶解即可。
终止液(stopbuffer) (2mol/LHzSO):
加去离子水至200ml。
缓冲甘油(glycerinebuffer)
甘油9份
PB () 1 份
将9份甘油与1份PB合并，充分混匀。
%HQ-甲醇液(HydrogenPeroxide-MethanolSolution) (总体积 120ml)
3%bQ 20ml
甲醇 100ml
DAB-HQ底物缓冲液(DAB-HQSubstrateBuffer)
取 6mg二氨基联苯***(3,3 ' -DiaminobenzidineTetrahydrochlorideDAB) 溶 解于。使用前取物口入到DAB容液中(H2Q的终浓度为％)。如有沉淀生成，则用滤 纸过滤。