文档介绍：百日咳诊断标准及处理原则GB15998—1995
、八.、■
前言百日咳是百日咳杆菌引起的呼吸道传染病，传染性强，在婴幼儿中有很高的病死率。临床表现以阵发性痉挛性咳嗽和痉咳终止时出现鸡鸣样吸气吼声为特征，多见于儿童，病程可达2〜3个月。（上标始）8（上标终）/mL及2X10（上标始）8（上标终）/mL二个浓度。
。
%酒精消毒，再用小试管蘸色素印在脊柱两侧、每只家兔可试验4个菌株。
，拔针时要在皮内稍稍扭转以免菌液流出。
。
〜72h观察坏死情况，并量坏死的大小。如两只家兔有一只注射4X10（上标始）8（上标终）个菌，注射部位出现坏死即为阳性。
A3免疫荧光法检测百日咳杆菌（直接法）

将已知百日咳抗血清用化学方法结合荧光色素制成荧光抗体，以此来浸染固定在玻片上的未知细菌，若为相应细菌，则两者结合面留在玻片上，不被缓冲液所冲掉。在荧光显微镜下有荧光出现。

，4°C冰箱保存备用。

蒸馏水1000mL

〜。。甘油缓冲液（），镜油可用液体石蜡代替。

，大小约1cm（上标始）2（上标终），火焰固定，用蜡笔将标本圈起。
，置湿盒，放37C温箱30min。
，用滴管吸取3〜5mL磷酸盐缓冲盐水将标本上荧光抗体冲洗，再依次浸入盛有磷酸盐缓冲液三个缸中浸泡，每缸3〜5min，并不时振荡。
、封载、镜检。
，还需作以下对照：
a）标本阴性对照：标本不加荧光抗体只加磷酸盐缓冲盐水。
b）阳性对照：荧光抗体加在已知阳性菌株标本上。
c）封闭试验：将标本先加未标记的同样抗血清作用30min,充分洗涤后再加标记抗体染色，若是阳性标本，应无特异荧光。
d）标本加正常未免疫的标记抗体，结果应无特异荧光。

＋＋＋＋：菌体显著膨大，黑心清楚，荧光明亮。＋＋＋：菌体膨大，黑心清楚，荧光明亮。＋＋：菌体稍膨大，形态清晰，有黑心，荧光较弱。＋：菌体不膨大，形态不清楚，荧光微弱。
－：细菌无荧光。
：细菌荧光在“＋＋”以上，在片上可看到分散或成堆出现形态典型的细菌。阳性对照
“++〜+++”阴性对照为阴性。
附录B
（提示的附录）
百日咳血清学诊断方法
B1百日咳试管凝集试验（半量法）
、红血球及其他颗粒性抗原，加入含有特异性抗体的血清，在有适当的电解质存在时，经一定时间作用后，可出现肉眼可见的凝集团块，利用这种现象进行已知抗原定量测定相应抗体或已知抗体测定抗原等