文档介绍：关于酶的固定化课件
第1页，讲稿共33张，创作于星期三
课程标准
1．尝试制备和应用固定化酶。
2．通过实验了解并探讨固定化酶的应用价值。
课标解读
1．说出固定化酶的作用、原理和制备方法。
2．了解木瓜蛋白酶的固定化及其制匀，待_____________后，切成8～9 mm3的小块，用
________和______洗净，即得到固定化的大肠杆菌细胞。
固定化酶和固定化细胞的制备
1．木瓜蛋白酶的应用
2．大肠杆菌细胞的固定化
蛋白质
氨基酸
酵母菌
发酵
啤酒产量
澄清醇和
液体
生理盐水
琼脂
45～50
琼脂凝胶凝固
生理盐水
蒸馏水
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在酶的固定化过程中，为什么不能使用金属工具？
提示 由于金属工具能够改变酶的电荷，故在进行酶的固定化操作过程中，不能使用金属工具，如金属镊子等。
[思维激活2]
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木瓜蛋白酶的固定化
(1)酶的固定化
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(2)检验酶的活性
取3只50 mL小烧杯，编号，分别加入20 mL体积分数为5%的蛋清稀释液。以1号烧杯作空白对照，向2号烧杯中加入刚制备的尼龙固定化酶。45 ℃水浴加热10 min。用玻璃棒将固定化酶块取出， mol/L的NaCl溶
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液冲洗。向1、2号烧杯中均加入双缩脲试剂A液和B液，观察烧杯中溶液颜色的变化。
(3)酶的再利用
向3号烧杯中加入刚从2号烧杯中取出的尼龙固定化酶。45 ℃水浴加热10 min。将固定化酶块捞出。再向3号烧杯中加入双缩脲试剂A液和B液，观察烧杯中溶液颜色的变化。
(4)结果记录
编号
溶液颜色变化
1
2
3
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(1)酵母细胞的活化
活化就是让由于缺水而处于休眠状态下的微生物重新恢复正常的生活状态。酵母菌活化需要1 h左右，酵母细胞活化后体积变大。
(2) mol/L的CaCl2溶液。
(3)配制海藻酸钠溶液： g海藻酸钠放入50 mL小烧杯中，加入10 mL水，用酒精灯小火加热(或者间断加热)，边加热加搅拌，反复几次，直至完全溶化，用蒸馏水定容至10 mL。如果海藻酸钠浓度过高，将很难形成凝胶珠；如果浓度过低，则形成的凝胶珠所包埋的酵母细胞的数目少，影响
拓展深化 固定化酵母细胞的制备与应用
1．制备固定化酵母细胞
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实验效果。
(4)海藻酸钠溶液与酵母细胞混合：将溶化好的海藻酸钠溶液冷却至室温，加入已经活化的酵母细胞，进行充分搅拌，使其混合均匀，再转移至注射器中。冷却的目的是防止高温杀死酵母菌。
(5)固定化酵母细胞：以恒定的速度缓慢地将注射器中的溶液滴加到配制好的CaCl2溶液中，观察溶液在CaCl2溶液中形成凝胶珠的情形。刚形成的凝胶珠应在CaCl2溶液中浸泡一段时间(约30 min)，以便形成稳定的结构。
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(1)将固定好的酵母细胞(凝胶珠)用蒸馏水冲洗2～3次。
(2)将150 mL质量分数为10%的葡萄糖溶液转移到200 mL的锥形瓶中，再加入固定好的酵母细胞，置于25 ℃下发酵24 h，可以看到产生了很多气泡，同时会闻到酒香。
2．用固定化酵母细胞发酵(应用)
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酶固定化技术与细胞固定化技术的关系是 ( )。
A．酶固定化技术是细胞固定化技术的基础
B．细胞固定化技术是酶固定化技术的基础
C．酶固定化技术与细胞固定化技术是同时发展起来的
D．细胞固定化技术先于酶固定化技术
答案 A
【巩固2】
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下列关于固定化酶和固定化细胞的叙述，不正确的是
( )。
A．固定化酶和固定化细胞的方法包括包埋法、化学结合
法和物理吸附法
B．固定化酶更适合采用化学结合法和物理吸附法
C．由于细胞个体大，而酶分子很小，因此细胞多采用物
理吸附法固定
D．反应物是大分子物质应采用固定化酶
【例1】
示例一 固定化酶与固定化细胞
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思维导图：
深度剖析 在酶和细胞的固定化技术中，通常有包埋法、化学结合法和物理吸附法，其中由于酶分子小，又多带电荷，易从多孔性物质中漏出，因此多使用化学结合法与物理吸附法，而细胞个体大，难以被多孔性物质吸附或结合，因而多采用包埋法。
答案 C
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归纳提升 固定化酶和固定化细胞的比较
固定化酶
固定化细胞