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临床基因扩增检验实验室工作规
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为使基因扩增检验技术有效地应DNA或cDNA扩增。此外，已制备的DNA模板和合成的cDNA(来自样本制备区)的参加和主反响混合液(来自试剂贮存和制备区)制备成反响混合液等也可在本区进展。在巢式PCR测定中，通常在第一轮扩增后必须翻开反响管，因此巢式扩增有较高的污染危险性，第二次加样必须在本区进展。
　　不能从本区再进入任何"上游"区域，可降低本区的气压以防止气溶胶从本区漏出。
　　为防止气溶胶所致的污染，应尽量减少在本区的走动。如有加样则应在超净台进展。
翻开预处理过的反响混合液时必须防止液体溅出，尤其是在巢式扩增步骤之间。一个简单的方法是在翻开反响管前快速离心数秒。可使用体积较小的离心机，因其所占实验台面小，易于用一只手操作，适合于大多数超净台。防潮屏障如石蜡油或轻矿物油也具有防污染作用，但必须注意的是，矿物油本身也可能成为一种持续性的污染源。用过的加样器必须注意清洁消毒。
　　完成操作及每天工作后都必须对实验室台面进展清洁和消毒，紫外照射方法与前面区域一样。如有溶液溅出，必须处理并作出记录。
(四)扩增产物分析区
　　下述操作在本区进展：扩增片段的测定。
　　核酸扩增后产物的分析方法多种多样，如膜上或微孔板上探针杂交方法(同位素标记或非同位素标记)、琼脂糖凝胶电泳、聚丙烯酰***凝胶电泳、Southern转移、核酸测序方法等。
目前国的商品试剂盒绝大局部均采用非同位素标记的微孔板上探针杂交方法，PCR-ELISA方法，也有膜上探针杂交方法。
　　本区是最主要的扩增产物污染来源，因此必须注意防止通过本区的物品及工作服将扩增产物带出。在使用PCR-ELISA方法检测扩增产物时，必须使用洗板机洗板，废液必须收集至1mol/LHC1中，并且不能在实验室倾倒，而应至远离PCR实验室的地方弃掉。用过的吸头也必须放至1mol/LHCl中浸泡后再放到垃圾袋中按程序处理，如燃烧。
　　由于本区有可能会用到*些可致基因突变和有毒物质如溴化乙锭、丙烯酰***、甲醛或同位素等，故应注意实验人员的平安防护。
　　本区的清洁消毒和紫外照射方法同前面区域。本区如采用负压条件或减压情况下(如安装排风扇)可减少扩增产物从本区扩散至前面区域的可能性。
二、临床基因扩增检验实验室质量保证
　　临床基因扩增检验实验室质量保证涉及到整个基因扩增检验的所有阶段，即测定分析前的标本采集处理、测定中的核酸提取、扩增和产物分析以及测定后的结果报告等。
(一)标本的采集
　　常用于基因扩增检测的临床标本包括EDTA或枸橼酸钠抗凝全血或骨髓、血清或血浆、痰、脑脊液、尿及分泌物等。采血液等样本时，应使用一次性密闭容器，如真空采血管。当使用非密闭采样系统时，如尿、分泌物和骨髓的采样，必须注意防止来自采样者的皮屑或分泌物的污染。采样时必须戴一次性手套。
　　玻璃器皿在使用前应高压处理，因为玻璃器皿常含有不易失活的RNA酶。最好是热灭菌，250℃烘烤4小时以上可使RNA酶永久性失活。
　　全血和骨髓标本必须进展抗凝处理。EDTA和枸橼酸盐是首选的抗凝剂。不能使用肝素抗凝，因