文档介绍：第三节 紫外—可见分光光度法
依据物质对光的选择性吸收建立起来的分析方法称为光化学分析法。光谱法和非光谱分析法。
光谱分析法是指在光（其它能量）的作用下，通过测量物质产生的发射光、吸收光或散射光的波长和强度来进行分析的方法。
时,溶液的吸光度A与液层厚度b成正比.
比耳定律(1852) A=lg(I0/It)=k2c
当入射光的 ,液层厚度b 一定时,溶液的吸光度A与吸光物质的c成正比.
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朗伯-比尔定律
意义:
当一束平行单色光通过均匀、透明的吸光介质时，其吸光度与吸光质点的浓度和吸收层厚度的乘积成正比.
A=lg(I0/It)=kbc
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透光率(透射比）T（Transmittance）
A = lg(I0/It) = lg(1/T) = —lgT = Kbc
吸光度A (Absorbance）
I0
It
入射光
透过光
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吸光度A、透射比T与浓度c 的关系
A
T (%)
c
A=kbc
100
80
60
40
20
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K 吸光系数 Absorptivity
a 的单位: L·g-1·cm-1
当c的单位用g·L-1表示时，用a 表示，
A＝a b c
的单位: L·mol-1·cm-1
当c的单位用mol·L-1表示时，用 表示.
－摩尔吸光系数 Molar Absorptivity
A＝ b c
当c的单位用g·100mL-1表示时，用 表示, A＝ bc， 叫做比吸光系数.
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吸光度与光程的关系 A = abc
b
2b
光源
检测器
显示器
参
比
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吸光度与浓度的关系 A = abc
c
2c
光源
检测器
显示器
参
比
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吸光度与波长的关系 A = abc
红
红
光源
检测器
显示器
参
比
蓝绿光
红光
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朗伯-比尔定律的适用条件
1. 单色光
应选用max处或肩峰处测定.
3. 稀溶液
浓度增大，分子之间作用增强.
2. 吸光质点形式不变
离解、络合、缔合会破坏线性关系,
应控制条件(酸度、浓度、介质等).
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溶液浓度的测定
A＝ b c
工作曲线法
(校准曲线)
朗伯-比尔定律的分析应用
0 c(mg/mL)
A
。 。 。 。
*
Ax
cx
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吸光度的加和性与吸光度的测量
A = A1 + A2 + … +An
用参比溶液调T=100%（A=0），再测样品溶液的吸光度，即消除了吸收池对光的吸收、反射，溶剂、试剂对光的吸收等。
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2 光度分析的方法和仪器
方便、灵敏，准确度差. 常用于限界分析.
光度分析的几种方法
观察方向
空白
c1
c2
c3
c4
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2. 光电比色法
光电比色计结构示意图
通过滤光片得一窄范围的光(几十nm)
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3. 吸光光度法和分光光度计
通过棱镜或光栅得到一束近似的单色光.
波长可调, 故选择性好, 准确度高.
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紫外-可见分光光度计
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光源
单色器
样品室
检测器
显示
基本组成
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分光光度计的主要部件
1 光源：发出所需波长范围内的连续光谱，有足够 的光强度,稳定。
/nm
钨灯（热辐射光源）
400
600
800
1000
氙灯（气体放电光源）
氢灯
强度
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1. 光源
在整个紫外光区或可见光谱区可以发射连续光谱，具有足够的辐射强度、较好的稳定性、较长的使用寿命。
可见光区：钨灯作为光源，其辐射波长范围在320～2500 nm。
紫外区：氢、氘灯。发射185～400 nm的连续光谱。
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氙灯
氢灯
钨灯
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单色器：将光源