文档介绍：Chapter 20 高效液相色谱法
黄河科技学院
信建豪
一. 定义:
经典液相色谱法为基础,
引入气相色谱法的理论和实验技术,
高压输送流动相,
高效固定相及高灵敏度检测器,
现代液相色谱分析方法。
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颗粒极细(一般为10m以下)、规则均匀的固定相,(键合相)传质阻抗小,柱效高,分离效率高;
高压输液泵输送流动相,流速快,分析速度快;
高灵敏度检测器,灵敏度大大提高。
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气相试样
液相试样
液相流动相
气体、容易转变为气体的液体
气体、
液体、
固体
常用氢气
、氮气
可用的
溶剂较多
气相柱温
液相柱温
高柱温
常温
气相流动相
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第一节高效液相色谱法的主要类型和原理
一、主要类型
四类基本类型色谱法
分配色谱法(partition chromatography)
吸附色谱法(adsorption chromatography)
离子交换色谱法(IEC)
空间排阻色谱法(SEC)
化学键合相色谱法
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其他色谱类型
亲合色谱法(affinity chromatography;AC)
手性色谱法(chiral )
胶束色谱法(micellar chromatography;MC)
电色谱法(electrochromatography;EC)
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二、化学键合相色谱法
:
键合相色谱法(bonded phase chromatography;BPC): 以化学键合相为固定相的色谱法。
化学键合相:采用化学反应的方法将官能团键合在载体表面所形成的固定相
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:
正相(normal phase,NP)键合相色谱法:
反相(reversed phase,RP)键合相色谱法:
根据化学键合相与流动相极性的相对强弱区分
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(一)正相键合相色谱法
固定相:极性键合相
如***基(-CN)、氨基(-NH2)或二羟基键合硅胶。
流动相:非极性或弱极性溶剂加极性调整剂
如烷烃加醇类。(与水不混溶的溶剂)
适用范围:
溶于有机溶剂的极性至中等极性的分子型化合物
如一些在硅胶柱上分离的物质
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(二)反相键合相色谱法
固定相:非极性键合相
如十八烷基硅烷(C18,ODS)、辛烷基(C8)键合硅胶
流动相:水为基础溶剂,加入一定量与水混溶的极性调整剂
常用甲醇-水、乙***-水等
应用:最广。非极性至中等极性的组分,(还有有机酸、碱及盐等极性组分)
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